关于蛋白质变性的问题

Question

1mL5%卵清蛋白溶液，加1mL95%乙醇，再加PH4.7的缓冲溶液，后加水8mL，再加0.1NHCL数滴，沉淀溶解，为什么？
1mL5%卵清蛋白溶液，加1mL0.1NNaOH，95%乙醇1mL，后加一滴甲基红，再加0.1N醋酸后加0.1NHCl数滴，沉淀溶解，为什么？
1mL5%卵清蛋白溶液，加1mLNHCl，1mL95%乙醇，后加一滴甲基红，再加0.1NNa2CO3后加0.1NHCl数滴，沉淀溶解，为什么？

Answer 1

1。有机溶剂助沉法 + 等电点法沉淀蛋白。乙醇有机溶剂变性蛋白 PH4.7的缓冲溶液更加沉淀蛋白。（卵清蛋白的等电点pI是4.6-4.7）当你加入HCL时，pH降低了,远离等电点，因此蛋白溶解了。

2。NaOH 加入后，一定远离pI,无沉淀。乙醇作用同1。此时加碱 一定呈现黄色。醋酸/醋酸盐缓冲溶液的pH=pka =4.757，因此加入醋酸后达到pI,蛋白沉淀。 0.1NHCl数滴，体系pH远离等电点，沉淀溶解.甲基红是pH指示剂，变色范围是pH4.2(红)--6.2(黄)，可以指示你2头都是溶解的，只有在橙色（pI 4.7左右)时沉淀。

3。（氯化铵）盐析 加 有机溶剂助沉 在一定浓度NH4Cl饱和度下，蛋白沉淀了，NaHCO3缓冲范围 9.1-10，因此，加入盐酸后，pH远离pI，盐析出来的蛋白被破坏了离子结构，溶解了。 甲基红指示剂，蛋白溶解时，溶液为黄色，即便加酸HCl 也不能超过橙色。（其实这里 不加最后的盐酸 蛋白也会溶解）

Answer 2

我们有时常常会看到变性的蛋白质在溶液中沉淀，蛋白质的变性的确与沉淀有密不可分的关系，但并不是所有变性的蛋白质都会在溶液中沉淀。具体地说，变性蛋白质一般易于沉淀，但也可不变性而使蛋白质沉淀，在一定条件下，变性的蛋白质也可不发生沉淀，变性蛋白质只在等电点附近才沉淀，沉淀的变性蛋白质也不一定凝固。例如，蛋白质被强酸、强碱变性后由于蛋白质颗粒带着大量电荷，故仍溶于强酸或强减之中。但若将强碱和强酸溶液的pH调节到等电点，则变性蛋白质凝集成絮状沉淀物，若将此絮状物加热，则分子间相互盘缠而变成较为坚固的凝块。

Answer 3

蛋白质变性实验说明了什么呢