E. coliDNA连接酶和T4 DNA连接酶有什么区别?

如题所述

一、指代不同

1、E.coliDNA连接酶:从大肠杆菌中获得的DNA连接酶。

2、T4连接酶:一单链多肽,分子量为68,000道尔顿,它能催化双链DNA上相邻的3ˊ羟基和5ˊ磷酸末断形成磷酸二脂键。

二、原理不同

1、E.coliDNA连接酶:一条分子量为75KD的多肽链。对胰蛋白酶敏感,可被其水解。水解后形成的小片段仍具有部份活性,可以催化酶与NAD(而不是ATP)反应形成酶-AMP中间物,但不能继续将AMP转移到DNA上促进磷酸二酯键的形成。

2、T4连接酶:T4DNA连接酶与辅助因子ATP形成酶-AMP复合物。


三、特点不同

1、E.coliDNA连接酶:只连接具有相同黏性末端的DNA分子的基本骨架,即磷酸二酯键。只能连接具有互补配对粘性末端的双链,对平末端效果不佳。

2、T4连接酶:分子生物学试验中主要采用T4DNA连接酶,因该酶在正常条件下,即能完成连接反应。T4 DNA 连接酶是一单链多肽,分子量为68,000道尔顿,它能催化双链DNA上相邻的3ˊ羟基和5ˊ磷酸末断形成磷酸二脂键。


参考资料来源:百度百科-T4DNA连接酶

参考资料来源:百度百科-DNA连接酶

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第1个回答  2023-12-22
E. coli DNA连接酶(Escherichia coli DNA ligase)和T4 DNA连接酶(T4 DNA ligase)都是DNA连接酶,用于连接DNA分子中的两个单链断裂,以形成一个连续的DNA链。尽管它们的基本功能相似,但它们之间存在一些区别:
1. **来源:**
- E. coli DNA连接酶来源于大肠杆菌(Escherichia coli),是细菌大肠杆菌的一部分。
- T4 DNA连接酶来源于噬菌体T4,这是一种感染大肠杆菌的噬菌体,T4 DNA连接酶主要在T4噬菌体感染过程中发挥作用。
2. **特异性:**
- E. coli DNA连接酶主要用于细菌DNA修复和DNA重组过程中,它在大肠杆菌的生物体系中起到关键作用。
- T4 DNA连接酶主要用于T4噬菌体的DNA修复、复制和重组,以确保噬菌体DNA的完整性。
3. **酶结构:**
- E. coli DNA连接酶和T4 DNA连接酶在结构上有一些差异,包括它们的氨基酸序列和三维结构。
4. **反应条件:**
- 不同的DNA连接酶可能对反应条件有一些要求差异。例如,T4 DNA连接酶通常需要较高的反应温度(约16°C至37°C)和较高的离子浓度,而E. coli DNA连接酶在适宜的反应条件下通常工作在体温(37°C)或略低的温度下。
尽管存在这些差异,E. coli DNA连接酶和T4 DNA连接酶都是DNA连接酶家族的代表性成员,它们在DNA分子修复、重组和合成中都发挥着重要作用。选择使用哪种连接酶通常取决于实验的特定需求和研究对象,以及所使用的生物体系。本回答被网友采纳