1、从结构上辨别：翡翠是纤维交织结构，通过放大镜观察，大都会看到组成矿物的颗粒；而玛瑙隐晶质集合体，结构致密，一般看不到结晶体的颗粒。
2、光泽：玛瑙的光泽比较柔和，表面光泽比较弱；翡翠的光泽比较强，表面光泽比较明亮。硬度：翡翠的硬度比玛瑙高很多，摩氏硬度为5-7，而玛瑙的摩氏硬度为7。
3、翡翠和玛瑙的化学成分不同。玛瑙的化学成分是二氧化硅，是隐晶质石英体。翡翠的化学成分是硬玉，纳铭辉石和霓石三种主要矿物按不同比例生成的。这是玛瑙和翡翠本质上的不同。它们根本就是两种不同的矿石。
4、翡翠和玛瑙的主要区别在于结构不同，翡翠是一种玉石，内部以纤维交织结构为主，通过光线照射可以看到明显的矿物颗粒，而玛瑙属于一种中性矿物，属于隐晶矿物的集合体，内部矿物颗粒看不到。
5、首先翡翠和玛瑙的硬度不同。翡翠的硬度为摩氏5-5度，表面不易被尖锐物体划伤。玛瑙的硬度为摩氏5-7度，表面容易留下较为深刻的印记。