色谱分析中常用的定量方法:内标法&外标法&面积归一法&自身对照法

如题所述

色谱分析的定量利器:内标法</


内标法是一种精密的定量手段。通过在样品中添加纯度确定的内标物,如一个非样品成分,如内标物条,然后测定其峰面积与待测组分的响应,利用特定公式计算出样品中待测组分的含量。内标物应满足关键条件:非样品成分、性质接近待测组分、易溶且不反应,且加入量与待测组分相近。


内标选择的策略与实例</


在核磁定量中,内标物应有明显的特征峰,与待测组分分离良好,且在氘代试剂中溶解且稳定。例如,A项目中,通过选择溶解于DMSO且具有8.1附近的特征峰的1.3.5-三甲氧基苯作为内标,确保测定结果的准确性。


外标法:精确测量的基石</


外标法以已知纯品为对照,通过比较样品与标准品的响应信号来定量。其优点在于操作简单,无需校正因子,但需确保标准品纯度高,且可能因仪器差异存在误差。B项目通过98.9%纯度的成品,使用峰高800的溶液,实现了精确的含量测定。


面积归一法:粗略但实用的纯度评估</


面积归一法适用于未知对照品的情况,通过计算各组分峰面积占总峰面积的百分比,评估样品的纯度。尽管它较为粗糙,但重复性好,进样条件变化影响小。然而,杂质响应因子差异可能导致误差,适用于初步杂质含量检查。


自身对照法:内标法的变种与主成分的精确控制</


自身对照法分为加校正因子和不加校正因子。前者如主成分内标,需要杂质对照品,而后者如峰面积归一化的特殊形式,适用于杂质与主成分响应因子相近的情况。通过精密测定,确保杂质控制的精准性。

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