一、物理消毒灭菌方法
医学实践中，物理消毒灭菌方法占主导地位，主要包括热力、紫外线、辐射、超声波和滤过除菌等技术。
（一）热力灭菌法
热力灭菌利用高温破坏微生物的蛋白质和核酸，使其变性凝固，核酸解链崩裂，从而实现杀菌效果。
1. 干热灭菌法
干热灭菌法包括焚烧、烧灼和干烤等方法。
（1）焚烧与烧灼
焚烧主要用于处理废弃的被病原微生物污染的物品、垃圾、人及动物尸体等。烧灼则用于微生物实验室的接种环、金属器械、试管口、瓶口等的小范围灭菌。
（2）干烤
干烤法使用干烤箱，通常需加热至160℃～170℃经2小时，可达到灭菌的目的。适用于玻璃器皿、瓷器、金属物品等的灭菌。
2. 湿热消毒灭菌法
湿热消毒灭菌法包括巴氏消毒法、煮沸法、流通蒸气法和高压蒸气灭菌法等。
（1）巴氏消毒法
巴氏消毒法主要用于较低温度杀灭病原菌或特定微生物，同时保持物品中不耐热成分不被破坏。此法有两种：一种为加热61.1℃～62.8℃、30分钟；另一种为加热71.7℃、15～30秒。目前，牛奶的消毒多采用后一种方法。
（2）煮沸法
煮沸法简单易行，煮沸100℃、5～10分钟可杀死细菌繁殖体。芽胞则需要煮沸1～2小时。常用于注射器、食具与饮水的消毒。
（3）流通蒸气法
流通蒸气法利用阿诺蒸锅或普通蒸笼，加热100℃、15～30分钟，可杀灭细菌的繁殖体。若将消毒后的物品放入37℃孵箱培养，使芽胞发育成繁殖体，次日再蒸一次，如此连续三次以上，可达到灭菌效果，这种方法称为间歇灭菌法。常用于不耐高温的物品，如糖类、血清和鸡蛋培养基等的灭菌。
（4）高压蒸气灭菌法
高压蒸气灭菌法是一种迅速而有效的灭菌方法。在高压蒸气灭菌器中，加热产生蒸气，随着蒸气压力不断增加，温度随之升高。通常压力在103.4kPa（相当旧制的15磅/吋²或1.05kg/cm²）时，器内温度可达121.3℃，维持15～30分钟，可杀灭包括芽胞在内的所有微生物。此法常用于一般培养基、生理盐水、手术器械及敷料等耐湿和耐高温物品的灭菌。
（二）紫外线与电离辐射
紫外线和电离辐射在消毒领域也有广泛应用。
1. 日光与紫外线
日光消毒是最简单、经济的方法。将病人的被褥、衣服、书报等在日光下曝晒数小时，可杀死表面的大部分微生物。日光中杀菌的主要成分是紫外线。紫外线波长200～300nm时，具有杀菌作用，其中以265～266nm波长的紫外线杀菌力最强。紫外线能透过石英，但不能穿过一般玻璃或薄纸，因此，紫外线只适用于物体表面及空气的消毒，如手术室、婴儿室、传染病房、无菌制剂室、微生物接种室等。
2. 电离辐射
电离辐射如X射线、γ射线和阴极射线等，具有较高的能量与穿透力，因而可产生较强的致死效应。其机制在于产生游离基，破坏DNA。电离辐射常用于大量一次性医用塑料制品的消毒，亦可用于中药成药和食品的消毒，而不破坏其化学成分和营养成分。
（三）超声波
超声波是一种高频声波，可通过水产生空化作用，破坏细菌细胞质的胶体状结构，使其胞膜、胞质分离，胞壁及胞膜破碎致细菌繁殖体死亡。此法主要用于粉碎细胞，以提取细胞组分或制备抗原等。
（四）微波
微波是一种电磁波，波长在1mm到1m左右。它能穿透玻璃、塑料薄膜与陶瓷等物质，但不能穿透金属表面。目前，微波常用于检验室用品、非金属器械、无菌病室的食品用具及其它用品的消毒。
（五）滤过除菌
滤过除菌是通过滤菌器阻拦过滤液体和气体的细菌，以达到无菌的目的。滤菌器含有微细小孔，只允许液体或气体通过，而大于孔径的细菌等颗粒不能通过。常用滤菌器有蔡氏滤器、玻璃滤器、薄膜滤器及高效颗粒空气滤器等。主要用于不耐热的血清、抗毒素、生物药品以及空气等的除菌。
二、化学消毒法
化学消毒法利用许多化学药物的抑制或杀灭微生物作用，分为化学消毒剂和化学治疗剂两类，用于消毒、防腐和治疗疾病。
（一）常用消毒剂的种类和应用
消毒剂是具有杀菌作用的化学药物，主要用于皮肤粘膜的伤口、器械、排泄物和周围环境的消毒。消毒剂在低浓度时也可作防腐用，但防腐剂的关键是应对人体无毒性作用。消毒剂种类、浓度与用途见表13-1。
表13-1 常用消毒剂的种类、浓度与用途
类别 | 名称 | 浓度 | 用途
--- | --- | --- | ---
重金属盐类 | 红汞 | 2% | 皮肤粘膜的小创伤消毒
升汞 | 0.05%～0.1% | 非金属器皿浸泡消毒
硝酸银 | 1% | 新生儿滴眼防淋球菌感染
氧化剂 | 高锰酸钾 | 0.1% | 皮肤粘膜消毒
过氧化氢 | 3% | 皮肤粘膜创口消毒
过氧乙酸 | 0.2%～0.5% | 塑料、玻璃器材消毒
碘酒 | 2.0%～2.5% | 皮肤消毒
氯 | 0.2ppm～0.5ppm | 饮水及游泳池消毒
漂白粉 | 10%～20% | 地面、厕所与排泄物消毒
醇类 | 乙醇 | 70%～75% | 皮肤、体温表消毒
酚类 | 石碳酸 | 3%～5% | 地面、器具表面的消毒
来苏 | 2% | 皮肤消毒
醛类 | 甲醛 | 10% | 物品表面、空气消毒
戊二醛 | 2% | 精密仪器、内窥镜消毒
表面活性剂 | 新洁尔灭 | 0.05%～0.1% | 皮肤粘膜、器械消毒
杜灭芬 | 0.05%～0.1% | 皮肤创伤冲洗、金属器械、塑料、橡皮类消毒
染料 | 龙胆紫 | 2%～4% | 浅表创伤消毒
酸碱类 | 醋酸 | 500mL/100m³ | 加等量水蒸发，空气消毒
食醋 | 2%溶液，3～5mL/m³ | 熏蒸消毒空气
生石灰 | 加水1：4或1：8 | 配成糊状，排泄物及地面消毒
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