美蓝染色观察
酵母菌形态实验得注意事项有哪些
一、目的和要求
1．观察酵母菌的出芽生殖方式,学习区分酵母菌
死活细胞的实验方法.
2．掌握酵母菌的一般形态特征及其与细菌的区别.
二、基本原理
1．形态观察：酵母菌是不运动的单细胞真核微生物,通常比常见细胞大几倍甚至十几倍.大多数酵母菌以出芽方式进行
无性繁殖,有的分裂繁殖；有性繁殖是通过接合产生子囊孢子.
2．死活鉴定：美蓝是一种无毒性的染料,它的氧化型呈蓝色,还原型呈无色.用美蓝对酵母的活细胞进行染色时,由于细胞的新陈
代谢作用,细胞内具有较强的还原能力,能使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的还原型.因此,具有还原能力的酵母活细胞是无色的,而死细胞或代谢作用微弱的衰老细胞则成蓝色或淡蓝色.
三、菌种：
酿酒酵母的斜面培养物
染液：吕氏碱性美蓝染液
四、操作步骤
制备酵母菌的菌悬液——在载玻片中央滴加1滴吕氏——碱性美蓝染色液——滴加1滴酵母菌的菌悬液于染色液中——盖上盖玻片——放置3分钟——高倍镜下观察——30分钟后再观察
关键步骤及注意事项
1、染液不宜过多或过少,否则,在盖上盖玻片时,菌液溢出或出现大量气泡.
2、用镊子取一块盖玻片,先将一侧与菌液接触,然后慢慢将盖玻片放下,使其盖在菌液上,盖玻片不宜平着放下,避免气泡产生.
五、实验报告：
绘图说明所观察的酵母菌的形态特征
六、预习
微生物大小的测定