马少骅演过的角色如下：
1996年，在濮存昕主演的反腐刑侦剧《英雄无悔》中饰演刘贵田，正式开始从事影视剧工作。
1998年，参演唐敬睿执导的司法题材电视剧《大法官》在剧中饰演王玉和一角。
1999年，与巫刚联合主演悬疑警匪剧《铁血警魂》饰演刑警队长连克勤。
2003年，主演由强小路执导的二十集人物传记题材电视剧《张大千敦煌传奇》，在剧中饰演中国国画大师张大千，该剧讲述了张大千在敦煌期间的故事；随后，在胡玫执导，陈宝国等人主演的历史正剧《汉武大帝》中饰演窦太后的侄子窦婴。
2004年，主演《当家人》，在剧中饰演一心一意为群众谋利益，带领群众艰苦创业、治穷致富的村党支部书记李天明。
2005年，与陶泽如共同主演由管虎执导的平实纪录式电视剧《生存之民工》，在剧中饰演一个色厉内荏、圆滑自私的老江湖，既可怜又可厌，善中有恶、恶中有善的河南民工谢老大；同年，主演反映唐太宗贞观之治时期的历史剧《贞观之治》，在剧中饰演唐太宗、唐高宗时期的宰相，深得太宗信任的长孙无忌一角。
2006年，搭档刘金山主演，由谢晓梅执导的战争喜剧《追杀横路靖六》，在剧中饰演文家村首户，乐善好施的文善仁。
2007年，参演刑侦题材剧《暗流》饰演李局长。
2008年，在主旋律题材电视剧《红灯记》中饰演一号反面人物日本军官鸠山；同年，与赵峥共同主演年代商界传奇剧《当家大掌柜》饰演一个忠义立身、充满东方式智慧的史大掌柜肖子富；同年，在梅花党系列谍战剧《秘密列车》中饰演周明天；随后，出演宁浩执导的喜剧电影《疯狂的赛车》，在影片中饰演扮演黄渤饰演的耿浩的师父。
2009年，与李亚鹏主演抗战剧《关中枪声》，在剧中饰演一个在当时陕西学界、政界颇有影响的人物梁守道；随后，在电视剧《好大一棵树》中饰演“100位新中国成立以来感动中国人物”之一的邓平寿。
2010年，主演由管虎编剧并执导的，现代都市生活题材电视剧《外乡人》，在剧中饰演脾气粗暴急躁爱算计，但是为人仗义的谢长发一角，并凭借该角色提名第25届中国电视金鹰奖最佳男演员。
2013年，与于震等人共同主演抗战剧《一个鬼子都不留》，在剧中饰演山西杂耍班班主，庄继宗的结拜大哥，游击队队员，后为救庄继宗而死的李占魁一角。
2014年，在刘烨、陈宝国主演的电视剧《北平无战事》中饰演林大潍一角；同年，与张国立、陈宝国共同主演电视剧《原乡》，在剧中饰演老兵杜守正；同年，与佟大为、关悦合作主演电视剧《我的儿子是奇葩》，在剧中饰演楚三福。
2015年，主演丁黑执导的历史题材电视剧《冯子材》在剧中饰演清末将领、民族英雄冯子材。
2016年，主演由罗灿然执导的亲情励志题材电视剧《搭错车》，饰演了一位以卖破烂为生，将自己的一生都奉献给了收养的女孩阿美的哑父；同年，参演由李雪执导的医疗题材都市剧《外科风云》，在剧中饰演仁合医院的院长傅博文一角。
2017年，主演文艺电影《匠心》，饰演性格孤傲冷僻的著名木雕工匠陆明松。
2021年2月1日，出演的电视剧《觉醒年代》播出，饰演蔡元培。
2022年1月28日，参演现实主义题材大剧《人世间》播出，饰演郝省长；8月1日，主演的长篇现实重大题材电视剧《运河边的人们》播出，饰演梁家轩。