医学遗传学考试题

Question

三、主观填空题
1. 在一个肿瘤细胞群体中，占主导地位的克隆就构成其( )。
2. 许多携有不同DNA片段的DNA克隆中含有基因组的全部基因即( )。
3. ( )改变而产生的疾病称为遗传病。
4. 减数分裂是指生殖细胞成熟过程中( )后，细胞连续分裂二次。
5. X连锁遗传中，基因的传递方式不同于常染色体上的基因。一般来说，男性的X连锁基因只能从母亲传来，将来只能传给他的女儿，这称为( )。
6. 1976年，Bishop 等用v-src的cDNA为探针与正常鸡细胞杂交，证实在鸡细胞基因组有一个与v-src同源的序列，称为( )。
7. 细胞癌基因的DNA中，单个碱基改变所致的( )，可使之被激活。
8. 在常染色体显性遗传病中，若纯合子和杂合子患者在表型上无差别时，称为( )。
9. 发生于近端着丝粒染色体间的易位称为( )。
10. 结构异常是指由于染色体断裂、重接后，形成结构改变的染色体，这个过程称为( )。
四、名词解释
1. PCR
2. Medical Genetics
3. 假基因
4. 遗传度
5. 复等位基因
6. 血红蛋白病
7. TSG
8. 动态突变
9. 功能克隆
10. X染色质
五、论述题
1. 试述缺口平移法标记探针的原理及过程。
3. 试述真核生物基因的结构。
4. 试述癌基因的功能分类及激活机理。
5. 简述Southern Blot杂交的原理、步骤及应用。

Answer 1

楼上答的挺多一看就是网上摘的，但有点错误，我更正和补充一下。

主观填空题
1.干系
2.基因组DNA
3.遗传物质
4.染色体（或DNA）复制一次
5.交叉遗传
6.细胞癌基因
7.点突变
8.完全显性遗传
9.罗伯逊易位
10.重排

四、名词解释
聚合酶链式反应(PCR) :Mullis K. 1985年发明的一种模拟天然DNA复制过程的核酸体外扩增技术。 具体即为在模板DNA、引物、4种dNTP存在条件下，依赖Taq DNA 聚合酶催化一对引物间特异DNA片段合成的体外扩增技术。

假基因：真核生物多基因家族中，与有功能的基因由同一个祖先基因进化而来，但不能表达功能产物的基因。其结构与正常基因非常相似，同源性较高，但不表达基因产物，是祖先基因经过多次突变、重复积累而成的。

复等位基因：是指群体中在某一个基因位点上,不只有两个基因(如A和a),而是有两个以上,甚至有几十个基因。如人的ABO血型就是由一组复等位基因决定的,这一组复等位基因是IA、IB、i三个基因。但是,对每个人来说,只可能具有其中的两个基因。

血红蛋白病：由于基因的突变等原因，导致珠蛋白的结构异常（异常血红蛋白病）或者是珠蛋白合成数量的异常（地中海贫血），最终所引起的一系列遗传性血液病。

遗传度：与单基因遗传病相比,多基因遗传不只是由遗传因素决定,而是由遗传因素与环境因素共同起作用。与环境因素相比,遗传因素所起的作用大小叫遗传度,或者说在多基因形状或疾病病症的获得中，遗传因素所起的贡献的大小。 用百分数表示。

动态突变：在某个特定基因的编码序列或者是侧翼序列中，存在许多短的串联重复序列，大多为三核苷酸串联重复序列（如(CGG)n,(CAG)n等）。在体细胞或生殖细胞的世代传递中，这些三核苷酸串联重复序列的重复次数不稳定而在一代一代传递中发生明显的增加，最终引发某些遗传病的发生，这种突变即动态突变。疾病类型有Hutington舞蹈病，强直性肌营养不良，脆性X染色体综合症等。

X染色质：在正常的雌性动物体细胞间期的细胞核中，紧贴核膜内侧，有一个染色较深的，大小为1微米的椭圆形小体成为X染色质，或称X小体、巴士小体（Barr）。它是细胞人X染色体异固缩而形成的。

五、论述题
3.真核生物基因组的结构特点：由染色体DNA和线粒体DNA组成。基因组DNA为线性结构，以染色体形态存在，末段序列特殊，由寡核苷酸短串联重复序列组成，成为端粒。真核生物基因组庞大，结构复杂，DNA有多个复制起点，染色体数目一定，除配子为单倍体，体细胞一般都是二倍体。 真核基因组存在大量非编码序列，编码序列不到10%。 还含有大量重复序列（高度重复、中度重复、单拷贝序列）。 真核生物的结构基因是断裂基因，不连续的，由外显子和内含子（插入序列）交替构成。 真核生物基因的转录产物为单顺反子mRNA。 真核生物基因组中存在各种基因家族，基因家族可以串联在一起，也可以相聚很远，但都是分别表达的。

4.细胞癌基因在正常情况下，编码一些列维持人体正常生长、分化、发育的蛋白，并起调节作用。异常情况下，被激活，导致细胞过度生长、无限增殖、异常分化，最终引发肿瘤。 癌基因的编码产物可分为以下几类：
（1）生长因子以及生长因子类似物类；（2）生长因子受体类；（3）与信号传导有关的传递蛋白类；（4）转录因子类（核内DNA结合蛋白）：如myc,myb,fos,jun等基因 （5）细胞凋亡相关因子： 如bcl-2基因
癌基因激活的机理有四：
（1）获得激动子与增强子：即楼上所说的癌基因的诱导，插入突变。
（2）染色体易位和重排：在此过程中，某些基因发生了易位和重排导致其在染色体上的位置改变，使原来无活性或低活性的原癌基因移至强启动子或增强子的附近而被活化 或者由于 易位使原癌基因与附近高表达的某个基因形成融合基因而被激活， 最后原癌基因表达增强，导致细胞的恶性转化，肿瘤的发生。
（3）原癌基因的扩增：细胞周期中DNA复制数次，导致原癌基因的拷贝数增加，其表达产物也大大增多，肿瘤发生。
（4）点突变：在射线或化学致癌剂作用下，原癌基因发生单个碱基的替换，从而改变了表达的蛋白的氨基酸组成，造成蛋白质结构的变异。

5. 简述Southern Blot杂交的原理、步骤及应用。
这个还是看书吧，书上写的简单清楚具体。 楼上的太啰嗦了，而且很多步骤也没必要。虹吸转移也一般不用了，太传统复杂，实验室现在一般都是电转移的印记法。

其他都是我按当年背的遗传、分生资料一个字一个字打上来的，也算回忆了一遍。。 希望对你有用。应该还算全面了

参考资料：医学分子生物学and遗传学

Answer 2

1.干系
2.基因组DNA
3.遗传物质
4.染色体复制一次
5.交叉遗传
6.显性致癌
7.突变
8.完全显性遗传
9.罗伯逊易位
10.染色体内易位

1. 聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction)，简称PCR，是一种分子生物学技术，用于放大特定的DNA片段。可看作生物体外的特殊DNA复制。

2.医学遗传学

3.假基因与有功能的基因在核苷酸顺序的组成上非常相似，却不具有正常功能的基因。是相应的正常基因在染色体的不同位置上的复制品，由于突变积累的结果而丧失活性。

4.在多基因遗传病中，易患性的高低受到遗传基础和环境因素的双重影响，其中遗传基础所起作用的大小称为遗传度或遗传率，一般用百分率表示。

5.一个基因如果存在多种等位基因的形式，这种现象就称为复等位基因

6.一组由于血红蛋白分子遗传缺陷引起的分子结构异常或肽链合成障碍的疾病。

7.与原癌基因编码的蛋白质促进细胞生长相反，在正常情况下存在于细胞内的另一类基因——肿瘤抑制基因的产物能抑制细胞的生长

8.在研究与人类神经系统遗传性疾病相关的基因时，在患者基因的编码序列中，或是编码序列两侧的序列中发现某个密码子的拷贝数目远远多于正常个体的拷贝数。

9.功能克隆（funetional cloning）是利用疾病已知的遗传损伤而引起的生化功能如蛋白质基酸缺陷的信息，进行基因定位，进而克隆该致病基因

10.上皮细胞等的间期核，用碱性染料染色后，在人的女性细胞靠近核膜处可观察到有一个长圆形的小体（长径稍大于1微米），过去叫做染色质，或称为巴尔氏小体。但后来发现了Y染色质，为避免混同，现一律改称为X染色质

此标记反应体系的主要成分有DNA酶I，大肠杆菌DNA聚合酶，3种三磷酸脱氧核糖核苷酸如dATP、dTTP、dGTP，一种核素标记的核苷酸32P—dCTP，待标记DNA片段。在极微量DNA聚合酶的作用下，在双链DNA分子的一条链上随机切开若干个缺口而不是切断DNA或将其降解，然后，大肠杆菌DNA聚合酶I在切口的3’—OH端逐个加入新的核苷酸，同时由于该酶具有5，—3’外切酶的活性，它同时切除5，端游离的核苷酸，3’端核苷酸的加入和5，端核苷酸的切除同时进行导致切口沿着DNA链移动。新链核苷酸的合成是以另一互补链为模板，按碱基互补的原则合成，所以新旧链的核苷酸序列完全相同。由于反应体系中含有一种或两种核素标记的单核苷酸，使新合成的链带有核素标记，所以缺口平移实际上是核素标记的核苷酸取代了原DNA链中不带核素的同种核苷酸。DNaseI是在两条链的不同部位随机打开缺口，从而使两条链都被核素均匀地标记，使得标记的DNA具有较高的放射比活性。

3.原核生物的基因组一般都是由单拷贝序列组成的。相对于原核生物，真核生物基因组显得比较复杂，除了单拷贝序列外，还包括其他简单重复序列、中度和高度重复序列等等，这些不同的序列在真核生物中起着不同的作用，各自担当不同的角色。

4.一、目前发现的细胞癌基因已超过100种，根据这些基因表达蛋白产物的功能可将细胞癌基因分为四大类： ⑴生长因子类：如c-sis癌基因，其编码产物为PDGF的β链。 ⑵G蛋白类：如ras家族，其编码产物为存在于细胞膜上的G蛋白，能传递生长信号。 ⑶受体及信号蛋白类：如src家族，其编码产物为细胞内的生长信号传递蛋白,通常含酪氨酸蛋白激酶活性。 ⑷转录因子类：如myc家族和myb家族，其编码产物为存在于细胞核内的转录因子。 二、癌基因的激活机制： 1．插入激活：指来源于病毒等的启动子或增强子插入到细胞癌基因的附近或内部而使其开放转录。 2．基因重排：基因从正常位置转移到另一位置，常常是插入一启动子后而使其转录活性增加。 3．基因扩增：基因数量的增加。 4．突变点：ras癌基因的点突变，导致其GTPase活性下降，从而使其保持激活状态。

5.原理Southern印迹杂交技术是分子生物学领域中最常用的具体方法之一。其基本原理是：具有一定同源性的两条核酸单链在一定的条件下，可按碱基互补的原 则形成双链，此杂交过程是高度特异的。由于核酸分子的高度特异性及检测方 法的灵敏性，综合凝胶电泳和 核酸内切限制酶分析的结果，便可绘制出DNA分子的限制图谱。但为了进一步构建出DNA分子的遗传图， 或进行目的基因序列的 测定以满足基因克隆的特殊要求，还必须掌握DNA分子中基因编 码区的大小和位置。有关这类数据资料可应用Southern印迹杂交技术获得。步骤 1．琼脂糖电泳 （1）取一定量的待测DNA样品，用适当的限制性内切酶酶切。DNA的量根据样品的种类及实验目的的不同而异，对于克隆片段的限制性内切酶图谱分析，取0.1-0.5μg即可；而对于鉴定基因组DNA中的单拷贝基因序列，则需要10～20μg；当采用寡核苷酸探针或探针的比放射性活性较低时，则需要30～50μg。 （2）酶切完毕，在琼脂糖凝胶中电泳。 （3）电泳结束后，EB染色，长波紫外线下观察电泳结果及照相。 2．印迹转移 （1）切胶并作标记（左下角切除），以便于定位，然后将凝胶置于一容器中。 （2）将凝胶浸泡于适量的变性液中，室温下放置1h 使之变性，不间断地轻轻摇动。 （3）将凝胶用去离子水漂洗1次，然后浸泡于适量的中和液中30 min，不间断地轻轻摇动。更换中和液，继续浸泡15 min。 （4）将滤纸，硝酸纤维素膜NC膜(以下简称NC膜）剪成与胶同样大小，NC膜浸入转移buffer中平衡30 min。 （5）按右图操作：逐层铺平，各层之间勿留有气泡和皱折。 （6）虹吸转移12-16h。 3．固定DNA （1）取出转移后的NC膜，用滤纸吸干NC膜，NC膜光面朝上平铺于变性液中变性5min。 （2）用相同的方法将NC膜平铺在中性液上，中和两遍，每遍5min。 （3）将膜夹在两张干燥滤纸间，80℃烘烤1-2h。 4．预杂交 （1）将膜浸入5×SSC 中2min，将膜放入干净的塑料袋中。 （2）将预杂交液事先在65℃ 预热，然后将10 ml 预杂交液加入袋中，封口。 （3）65℃预杂交1h 以上，不时摇动。 5．杂交 （1）取出杂交袋，剪去一角去除杂交液后，加入5ml杂交液及5μl 变性探针，排除气泡后封口。 （2）将杂交袋放入65℃ 水中杂交过夜。 6．按下列条件洗膜 2×SSC, 0.1%SDS 50ml 室温 5min /2次 0.1×SSC, 0.1%SDS 50ml 65℃ 15min /2次 7．免疫酶联检测 （1）偶联反应 ①用中和液 洗膜2min，室温。 ②用封闭液50ml洗膜30min，室温，轻摇。 ③用中和液将稀释抗体-Dig –Ap 至750 mU/ml ，将膜封入杂交袋，加入5 ml稀释抗体轻摇50min。 ④用中和液 50 ml洗膜，10min ×2次，室温，轻摇，除去未结合的抗体。 （2）显色反应 ①用平衡液20 ml平衡膜2min。 ②将膜装入杂交袋中，加入5ml显色液，避光30min 左右，当出现颜色时不要晃动。 ③用TE洗膜终止反应。 ④80℃烤干。应用遗传病诊断，DNA图谱分析，检测样品中的DNA及其含量，PCR产物分析等。

Answer 3

不会