以基因为模板，pcr方法获得基因，运用puc18载体说明克隆和筛选过程

Question

如题所述

Answer 1

根据基因，用Primer Premier 5 软件设计引物合成引物。利用高保证酶进行PCR扩增，扩增产物经纯化或胶回收得到目的片段。将目的片段、载体、Buffer按使用说明混合均匀过夜。经转化（重组载体加入感受态细胞，冰浴30min，42度热激90s，加入LB培养1.5--2h，收集菌体涂平板）14-16h后挑取单克隆培养4-6h后即可通过PCR进行阳性克隆的检测。