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圆盘聚丙烯酰胺凝胶制胶流程
聚丙烯酰胺凝胶制备
答:
3.操作法 (1)
制胶
用30%
丙烯酰胺
溶液-分离胶缓冲液-20%十二烷基硫酸钠溶液-10%过硫酸铵溶液(新鲜配制)-四甲基乙二胺-水(5.0∶1.5∶0.08∶0.1∶0.01∶5.3)制成分离胶液,灌入模具内至一定高度(剩余体积留作制备浓缩胶用),用水封顶,聚合完毕,倾去水层。再用30%丙烯酰胺溶液-...
怎样
制备聚丙烯酰胺凝胶
?
答:
配制 Tris- 甘氨酸 SDS-PAGE
聚丙烯酰胺凝胶
电泳分离胶所用溶液 溶液成分 不同体积( ml )凝胶液中各成分所需体积( ml )5 10 15 20 25 30 40 50 6% SDS-PAGE 水 2.6 5.3 7.9 10.6 13.2 15.9 21.2 26.5 30% 丙烯酰胺溶液 1 2 3 4 5 6 8 10 10% SDS 0.05 0.1...
变性
聚丙烯酰胺凝胶
的
制备
方法
答:
1.胶板准备(1)胶板的清洁是灌胶能否成功的第一关键步骤。反复使用时要将玻璃板和间隔片上
凝胶
去除干净,彻底洗净后干燥。用乙醇擦拭玻璃板上残留水渍。不能有一点残留的凝胶和残渣,否则灌胶时会产生气泡。(2)灌胶前要对玻璃板分别进行处理。长玻璃用亲和硅烷,短玻璃用剥离硅烷处理,便于电泳结束后长...
试述
聚丙烯酰胺凝胶
毛细管
制备过程
。
答:
为了
制备
没有气泡且稳定的毛细管,可以采用高压灌胶方式,即将灌入丙烯酰胺反应溶液的毛细管置于高压环境中,预先将反应溶液压缩至成胶后的体积,然后开始聚合反应,制备的
聚丙烯酰胺凝胶
毛细管两端插入缓冲液中储存。
聚丙烯酰胺
的生产步骤
答:
产品丙烯酰胺中不含金属铜离子,不需进行离子交换来出去生产
过程
中所产生的铜离子,简化了工艺
流程
,此外,气相色谱分析表明丙烯酰胺产品中几乎不含游离的丙烯腈,具有高纯性,特别适合
制备
超高相对分子质量的
聚丙烯酰胺
及食品工业所需的无毒聚丙烯酰胺。微生物催化丙烯酰胺单体生产技术,首先由日本在1985年建立...
聚丙烯酰胺凝胶
是如何聚合?
答:
过硫酸铵就是引发剂,而TEMED可以催化过硫酸铵产生自由基,从而加速丙烯酰胺凝胶的聚合。聚丙烯胺凝胶由单体丙烯酰腋甲叉双丙烯酰胺聚合而成,催化聚合的常用方法有两种: 化学聚合法和光聚合法。化学聚合以过硫酸铵(AP)为催化剂,以四甲基乙二胺(TEMED)为加速剂。
聚丙烯酰胺凝胶
电泳简称PAGE ,是以聚丙烯...
聚丙烯酰胺凝胶
电泳实验操作
过程
中,应注意哪些事项?
答:
一、
凝胶制备
时:TEMED和AP要后加,加入后用玻棒缓慢匀速的混匀,避免有气泡产生;然后马上注入电泳槽内,插入梳子,这时也要匀速,但不能太慢,因为太慢的话底部的胶会比上面的胶凝的快,影响胶的质量,同时小心有气泡;二、加样时要注意:1.每空的上样量不能过大,以免样品溢出,造成各泳道相互...
跪求
聚丙烯酰胺
的生产工艺
答:
一般
聚丙烯酰胺
胶体是采用8%-10%丙烯酰胺水溶液在引发剂作用下直接聚合而得;聚丙烯酰胺干粉则多用25%-30%丙烯酰胺溶液进行聚合,聚合后得到的聚丙烯酰胺胶体经造粒、捏合、干燥、粉碎后制得产品。其中的聚合反应是关键工序。该法具有生产安全、工艺设备简单以及生产成本较低等特点,是目前国内外生产聚丙烯...
15%变性
聚丙烯酰胺凝胶
电泳的步骤
答:
实验步骤:
凝胶
的
制备
:1、 清洗干净两块玻璃板,晾干后按要求装配好垂直电泳板,两块玻璃板的两侧及底部用1%的琼脂糖封边,防止封闭不严而使
聚丙烯酰胺
液漏出。2、 将装好的玻璃电泳板倾斜成45~60℃角。把玻璃板在灌胶支架上固定好。3、 分离胶:按1∶3∶8∶水=1∶2∶4∶1的比例,先将贮备...
聚丙烯酰胺
盘状
凝胶
电泳的几个不连续性是什么
答:
电泳结束后将胶条剥出,经染色、脱色处理,从胶条侧面可见到一个一个的组分条带,与多个
圆盘
迭加在一起相似,故将在柱胶中进行的电泳分离技术称为
聚丙烯酰胺凝胶
盘状电泳。实际操作时,在玻璃管中分两次灌胶。先灌下层的分离胶,待其聚合后再灌上层的浓缩胶。这样制得的凝胶柱实际上是个不连续体系...
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