怎样制备聚丙烯酰胺凝胶？

Question

在制备时，所用试剂都有哪些，配制时各试剂的比例是多少以及在配制过程中都需要注意哪些问题？（请大家尽快赐教啊^_^）

Answer 1

聚丙烯酰胺凝胶电泳凝胶的配制

配制 Tris- 甘氨酸 SDS-PAGE 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离胶所用溶液

溶液成分 不同体积（ ml ）凝胶液中各成分所需体积（ ml ）

5
10
15
20
25
30
40
50

6% SDS-PAGE

水
2.6
5.3
7.9
10.6
13.2
15.9
21.2
26.5

30% 丙烯酰胺溶液
1
2
3
4
5
6
8
10

10% SDS
0.05
0.1
0.15
0.2
0.25
0.3
0.4
0.5

10% 过硫酸氨
0.05
0.1
0.15
0.2
0.25
0.3
0.4
0.5

TEMED
0.004
0.008
0.012
0.016
0.02
0.024
0.032
0.04

8% SDS-PAGE

水
2.3
4.6
6.9
9.3
11.5
13.9
18.5
23.2

30% 丙烯酰胺溶液
1.3
2.7
4
5.3
6.7
8
10.7
13.3

1.5 mol/L Tris (pH8.8)
1.3
2.5
3.8
5
6.3
7.5
10
12.5

10% SDS
0.05
0.1
0.15
0.2
0.25
0.3
0.4
0.5

10% 过硫酸氨
0.05
0.1
0.15
0.2
0.25
0.3
0.4
0.5

TEMED
0.003
0.006
0.009
0.012
0.015
0.018
0.024
0.03

10% SDS-PAGE

水
1.9
4
5.9
7.9
9.9
11.9
15.9
19.8

30% 丙烯酰胺溶液
1.7
3.3
5
6.7
8.3
10
13.3
16.7

1.5 mol/L Tris (pH8.8)
1.3
2.5
3.8
5
6.3
7.5
10
12.5

10% SDS
0.05
0.1
0.15
0.2
0.25
0.3
0.4
0.5

10% 过硫酸氨
0.05
0.1
0.15
0.2
0.25
0.3
0.4
0.5

TEMED
0.002
0.004
0.006
0.008
0.01
0.012
0.016
0.02

12% SDS-PAGE

水
1.6
3.3
4.9
6.6
8.2
9.9
13.2
16.5

30% 丙烯酰胺溶液
2
4
6
8
10
12
16
20

1.5 mol/L Tris (pH8.8)
1.3
2.5
3.8
5
6.3
7.5
10
12.5

10% SDS
0.05
0.1
0.15
0.2
0.25
0.3
0.4
0.5

10% 过硫酸氨
0.05
0.1
0.15
0.2
0.25
0.3
0.4
0.5

TEMED
0.002
0.004
0.006
0.008
0.01
0.012
0.016
0.02

15% SDS-PAGE

水
1.1
2.3
3.4
4.6
5.7
6.9
9.2
11.5

30% 丙烯酰胺溶液
2.5
5
7.5
10
12.5
15
20
25

1.5 mol/L Tris (pH8.8)
1.3
2.5
3.8
5
6.3
7.5
10
12.5

10% SDS
0.05
0.1
0.15
0.2
0.25
0.3
0.4
0.5

10% 过硫酸氨
0.05
0.1
0.15
0.2
0.25
0.3
0.4
0.5

TEMED
0.002
0.004
0.006
0.008
0.01
0.012
0.016
0.02

参考资料：http://www.wzmc.net/swzx/lab/swsy/dbz-dy.html

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