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蛋白表达载体
最常用的真核细胞
表达载体
有哪些?各在哪些细胞中表达?
答:
真核细胞常见表达载体 1.pCMVp-NEO-BAN载体 特点:该真核细胞表达载体分子量为6600碱基对,主要由CMVp启动子、兔β-球蛋白基因内含子、聚腺嘌呤、氨青霉素抗性基因和抗neo基因以及pBR322骨架构成,在大多数真核细胞内都能高水平稳定地表达外源目的基因.2.pEGFP,增强型绦色荧光
蛋白表达载体
(Enhanced Fluorec...
如何构建一个
蛋白
基因的
表达载体
答:
构建
表达载体
首先取决于你的实验目的,例如你的实验是否要求你的
蛋白表达
出来必须可溶性蛋白,载体上面的标签决定了你的纯化方法,当然也决定了实验成本,等等一系列需求。 拿带标签的载体为例,因为带标签后可以增加蛋白质的可溶性,也为纯化带来了方便,一般都会采用。标签一般都是在目的蛋白的N端,这样就...
...采用E.coli表达有用的
蛋白质
必须使构建的
表达载体
具备哪些主要条件...
答:
【答案】:运用E.coli表达有用的
蛋白质
必须使构建的
表达载体
具备下列主要条件:①含大肠杆菌适宜的选择标志;②具有能调控转录、产生大量mRNA的强启动子,如lac、tac启动子或其他启动子序列;③含适当的翻译控制序列,如核蛋白体结合位点和翻译起始点等;④含有合理设计的多接头克隆位点,以确保目的基因按...
蛋白表达
用哪种表达方式比较好呢?常用的表达方式是哪种呢
答:
1、宿主。
表达蛋白
的生物体。可以为细菌、酵母、植物细胞、动物细胞等。由于各种生物的特性不同,适合表达蛋白的种类也不相同。2、载体。载体的种类与宿主相匹配。根据宿主不同,分为原核(细菌)
表达载体
、酵母表达载体、植物表达载体、哺乳动物表达载体、昆虫表达载体等。载体中含有外源基因片段。通过载体...
4T-1
载体
GST在基因的上游还是下游
答:
pGEX-4T-1载体是一种常用的原核表达载体,具有Amp抗性,质粒大小为4.9 kb。该载体多克隆位点区域含有多个常用的内切酶位点序列,便于不同基因的克隆;且全序列中含有tac启动子、GST标签序列,GST标签位于融合基因的N端,是一种高效的
蛋白表达载体
。Tac启动子在没有诱导物存在的情况下,质粒上携带的lacIq...
常用的基因工程原核启动子有哪些
答:
1、质粒载体 pBR322 2、克隆载体 3、表达质粒载体真核细胞常见
表达载体
.pCMVp-NEO-BAN载体 特点:该真核细胞表达载体分子量为6600碱基对,主要由CMVp启动子、兔β-球
蛋白
基因内含子、聚腺嘌呤、氨青霉素抗性基因和抗neo基因以及pBR322骨架构成,在大多数真核细胞内都能高水平稳定地表达外源目的基因. ...
如何采用一个真核
表达载体
中表达多个
蛋白
答:
方法有好多的:分开
表达
,装不同的promoter,启动不同的
蛋白
转录。融合蛋白,就是把两个蛋白融合在一起表达。如果要用酶切开,可以在中间加入一段link。加入ires--内部核糖体进入位点,虽然两个蛋白是用一个promoter启动的,但是蛋白石分开翻译的。等等~不多举例啦~...
蛋白
的
表达
与纯化
答:
pET
载体
中,目标基因克隆到 T7 噬菌体强转录和翻译信号控制之下,并通过在宿主细胞提供 T7 RNA 聚合酶来诱导表达。 Novagen 的 pET 系统不断扩大,提供了用于表达的新技术和选择,目前共包括 36 种载体类型、 15 种不同宿主菌和设计用于有效检测和纯化目标蛋白的许多其它相关产品。 优点· 是原核
蛋白表达
引用最多...
蛋白表达
实验的整个流程是什么?
答:
蛋白表达
实验是一种常用的生物学实验技术,用于大规模合成目标蛋白。以下是蛋白表达实验的一般流程:基因克隆:从感兴趣的源中提取目标蛋白的基因序列,并将其克隆到适当的
表达载体
上。常用的载体包括质粒和病毒。转染/转化:将重组的表达载体导入到宿主细胞中。对于真核细胞,常用的方法是转染;而对于细菌...
蛋白质
工程需不需要构建基因
表达载体
答:
需要。
蛋白质
工程也是通过定向的改变基因的结构来改变蛋白质结构的。所以操作顺序与基因工程类似,只不过加了一部根据蛋白质结构设计基因的过程。
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