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防止基因自身环化的措施
基因工程中如何
避免
载体
的自我环化
和目的
基因的
双向插入?
答:
双酶切
。在基因两端分别用不同的内切酶来酶切,载体上也用这两种酶来酶切。这样自己的酶切位点只能识别自己的位点,就不会发生基因方向的错误了。而且载体的两个位点互相不识别,也不会自连接。
在
基因
克隆中如何
防止
载体分子的
自身环化
作用
答:
如果你使用的是酶切连接,选择不同黏末端的酶一般不会发生自身环化 如果是平端连接,
则需要对载体去磷,也就是碱性磷酸酶处理
。此时需要注意你的插入片段两边要有磷酸基团(可以引物合成时添加,也可设计平端的酶如EcoRV自己回来切),否则是连不上的。
可以通过什么办法
防止
限制性内切核酸酶切割后的dna
自身环化
_百度...
答:
自身会发生连接成为环状DNA,
不利目的基因导入.故使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA
,各自会有不同黏性末端,能防止自身环化.Ⅱ.原核生物(如大肠杆菌)是基因工程中较理想的受体细胞,具有一些其他生物没有的特点:①繁殖快,能大量快速复制DNA;②多为单细胞,结构简单,容易操作;③...
普通番茄细胞中含有多聚半乳糖醛酸酶
基因
(PG),控
答:
(1)过程①表示基因表达载体的构建,此过程通常会用两种限制酶切割目的基因,以产生不同的黏性末端
,这样可以防止目的基因自身环化,保证目的基因可以和质粒定向连接.(2)经过程②可获得三种土壤农杆菌,除依据质粒上的标记基因筛选出的含重组DNA的土壤农杆菌外,还有不含质粒、含普通(非重组)质粒两种...
基因
工程。用两种限制酶切质粒可以
防止自身环化
?那为了黏性末端相同是...
答:
1用两种限制酶切质粒可以
防止自身环化
。2为了黏性末端相同,切外源DNA也要用两种不同的限制酶切割。你说的都对。这里建议你再思考一下,用一种酶切质粒和用两种酶切质粒的所有情况。(之后我会说的)
...和含目的
基因的
DNA,可以
防止
质粒和目的
基因自身环化
,那
答:
取下一段目的
基因
要切两次,也就是说这里切的两次可以分两种不同的酶来切,同样的,载体也需要切两次同样也是用这两种酶来切,这样有两组碱基的互补配对,就
可以避免
载体和载体配对以及目的基因和目的基因配对。(不太确定啊。。。)
...在
基因
工程中,用2种酶切目的基因是防治
自身环化
,那么就会产生2种黏 ...
答:
将目的
基因
和质粒都用两种不同的酶,形成可以互补“嵌合”的切口,这时再施加DNA连接酶,就可以自己组合了。就像一个平末端,一个粘性末端那样,就不怕
自身环化
。质粒上应该是切两次的,但只会产生一个切口,你可以自己画个圆环试试,一边用直线,一边用锯齿形。参考资料:我是高三物生的,说不定是你...
种酶切目的
基因
是防治
自身环化
,”而书上为什么又说
答:
用同一种限制酶目的是让运载体的末端和目的
基因的
末端互补.所以为了
防止环化
,需要对运载体加以修饰改造,使运载体的两个末端也不相同并且都刚好与目的基因的末端互补.
...可以
防止
质粒和含同的
基因的
外源DNA片段
自身环化
答:
每种限制性内切酶的酶切位点是不一样的,因此,不同的酶切位点不能连到一起,相同的才可以。用不同的切,到连接的时候,可以有效
防止
载体自连,只能让外源DNA片段和载体之间那相同的酶切位点相互连接。
...脱氧核苷酰转移酶处理载体后,可
防止
载体
自身环化
,提高重组效率_百度...
答:
用的是碱性磷酸酶处理吧。把DNA的5’-P末端转换成5’-OH末端。这样来防止载体自身环化。末端转移酶理论上不能
防止自身环化
。它一般用在cDNA的RACE中,来扩增cDNA。
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