44问答网
所有问题
当前搜索:
DNA凝胶电泳上样缓冲液
电泳缓冲液
概述
答:
TBE具有较强的缓冲能力,适合长时间电泳,特别是对小于1kb片段的分离效果优良。然而,TBE在琼脂糖
凝胶电泳
中可能产生高电渗作用,影响
DNA
片段的回收率,因此不建议用于回收电泳实验。TPE的缓冲能力同样出色,但由于磷酸盐在乙醇沉淀过程中可能析出,故也不适用于DNA片段的回收电泳。选择何种
缓冲液
,需根据实验...
琼脂糖
凝胶电泳
操作流程
答:
选择
凝胶
浓度是关键,0.5%至2%是常用的范围。低浓度适合大片段核酸,高浓度用于小片段分析,但需小心操作并选用高质量琼脂糖以避免低浓度胶的易碎问题。高浓度可能导致分子大小相近的
DNA
难以分辨,形成模糊的条带。常用的
电泳缓冲液
有TAE和TBE,TBE的缓冲效果更好,新制的缓冲液能提高电泳效果。然而,频繁...
琼脂糖
凝胶电泳
详解
答:
琼脂糖凝胶的魅力与挑战 琼脂糖
凝胶电泳
,凭借分子筛与电泳的双重作用,操作简便,分辨率高,透明度佳,易于染色。然而,其机械强度稍显不足,容易受到污染,是这项技术需谨慎对待的方面。影响因素与实验步骤 实验成功与否,很大程度上取决于
DNA
大小、分子构象、电压的选择,以及琼脂糖种类和
缓冲液
(如离子...
脉冲场
凝胶电泳
琼脂糖凝胶块中
DNA
的限制性内切酶消化
答:
接下来,混合酶反应所需的成分,包括高、中或低盐
缓冲液
,根据酶的特性可能还需添加100 mmol/L的亚精胺(仅适用于高盐缓冲液)。一般来说,10到20单位的内切酶就足以在过夜的时间内完全消化10μg的
DNA
,但需设置阴性对照,排除非特异性降解的可能。将
凝胶
块转移到反应混合溶液中,通常使用消毒手术刀...
loading buffer的作用
答:
资料拓展:oadingbuffer的中文名字叫
上样缓冲液
,6*的缓冲液中可以显示两条带,前面的紫蓝色的条带是溴酚蓝,在0.6%、1%、1.4%和2%琼脂糖
凝胶电泳
中,溴酚蓝的迁移率分别与1Kb、0.6Kb、0.2Kb和0.15Kb的双链线性
DNA
片段大致相同。后面的蓝色条带是二甲苯氰,它在1%和1.4%琼脂糖中电泳时,其...
血
dna
琼脂糖
电泳
图怎么看是否降解
答:
那是他们提取的时候变性时间太长,变性的质粒
DNA电泳
的时候走在超螺旋DNA的前面,染色较淡。变形的原因通常是
上样
量太大,也有可能是
凝胶
、
缓冲液
的原因。
PCR-SSCP原理和操作步骤
答:
PCR-SSCP的缺点是存在假阴性和假阳性,一般对长度不超过300bp的待测片段的检出率为70~80%。步骤 1.PCR反应(同前)PCR产物经琼脂糖电泳确认。2.PCR反应结束后,取5μl扩增产物加10μl甲酰胺
上样缓冲液
混匀,98℃ 变性10分钟,迅速冰浴。3.非变性聚丙烯酰胺
凝胶电泳
3.1 制备50ml 6%非变性...
荧光定量PCR的操作步骤
答:
×100 ×40 μg/ml = 840 μg/ml 或 0.84 μg/μl取5ul用来测量以后,剩余样品RNA为35 μl,剩余RNA总量为:35 μl × 0.84 μg/μl = 29.4 μg②纯度检测RNA溶液的A260/A280的比值即为RNA纯度,比值范围1.8到2.1。2)变性琼脂糖
凝胶电泳
测定①制胶1g琼脂糖溶于72ml水中,...
请问RT-PCR的主要过程是什么?稍微详细点 谢谢~~
答:
不晓得你说的是RT-PCR(reverse transcription PCR)呢,还是实时PCR(real-time PCR)。如果是反转录的话,步骤如下:1.
电泳
定量RNA或直接测定RNA浓度。2.反转录体系:(20 μl)RNA+DEPC 水: 11μl, RNA量1-5μg Oligo dT: 1μl 5X RTase Buffer: 4μl (10X RTase Buffer 2μl + 2μl...
琼脂糖
凝胶电泳
跑成这样是怎么回事?
答:
最可能原因是你的样品中
DNA
就那么大。如果你是提取质粒的话,你做错某步,把细菌的核DNA提取出来了,所以才那么大。你做错的可能是裂解那步,裂解时间超过5分钟了或者你剧烈混合裂解液和细菌了,只有invert就可以了。你
上样
量也要保证,测一下浓度,一般200ng的条带就非常亮了。跑胶时候,电压一般80...
棣栭〉
<涓婁竴椤
30
31
32
33
35
36
37
38
39
涓嬩竴椤
34
其他人还搜