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DNA凝胶电泳上样缓冲液
凝胶电泳
中,使用
上样缓冲溶液
的目的是什么?请简要回答
答:
电泳时正极与负极都会发生电解反应,正极发生的是氧化反应(4OH--4e->2H2O+O2),负极发生的是还原反应(4H++4e->2H2),长时间的电泳将使正极变酸,负极变碱。一个好的缓冲系统应有较强的缓冲能力,是溶液两极的pH保持基本不变。
电泳缓冲液
的另一个作用是使溶液具有一定的导电性,以利于
DNA
分子的...
凝胶电泳
中,使用
上样缓冲溶液
的目的是什么?请简要回答
答:
以利于
DNA
分子的迁移,例如,一般
电泳缓冲液
中应含有0.01-0.04mol/L的Na+离子,Na+离子的浓度太低时电泳速度变慢;太高时就会造成过大的电流使胶发热甚至熔化.电泳缓冲液还有一个组分是EDTA,加入浓度为1-2mmol/L,目的是螯合Mg2+ 等离子,防止电泳时激活 DNA酶,此外还可防止Mg2+离子与核酸生成沉淀.
用琼脂糖
凝胶电泳
分离
DNA
样品时,电泳
缓冲液
的PH 值应该在什么范围之内...
答:
主要是看tris的缓冲范围,Tris
缓冲液
的有效缓冲范围在pH7.0到9.2之间,算是中性和偏碱性.
DNA
肯定是要带负电荷的,所以
电泳
的时候才会向正极跑.电泳槽一般都会标明正负极的,只要把电源和电泳槽的正负极对应就好了.
用琼脂糖
凝胶电泳
分离
dna
样品时,电泳
缓冲液
的ph值应该在什么范围之内...
答:
主要是看tris的缓冲范围,Tris
缓冲液
的有效缓冲范围在pH7.0到9.2之间,算是中性和偏碱性.
DNA
肯定是要带负电荷的,所以
电泳
的时候才会向正极跑.电泳槽一般都会标明正负极的,只要把电源和电泳槽的正负极对应就好了.
TAE
电泳缓冲液
有没有毒
答:
TAE电泳
缓冲液
本身没有毒。TAE缓冲液是由三羟甲基氨基甲烷(Tris base)、乙酸(acetic acid)和乙二胺四乙酸(EDTA)组成的缓冲液,英文名为三种组成成分的首字母。在分子生物学实验中常被用作
DNA
或RNA进行
凝胶电泳
时的缓冲液。缓冲液在电泳过程中的一个作用是维持合适的pH。
loadingbuffer和sds-page有什么区别
答:
lodingbuffer即
电泳上样缓冲液
、sds-page即聚丙烯酰氨
凝胶电泳
。loadingbuffer中含有甘油,起到沉降
DNA
(即PCR产物)的作用,色素溴酚蓝(BromophenolBlue)、二甲苯腈蓝FF(XyleneCyanolFF),可以观察电泳的进行情况。聚丙稀酰胺是由丙稀酰胺和N,N'-亚甲基双丙稀酰胺经共聚合而成。带电颗粒在电场作用下...
在进行
DNA凝胶电泳
时,制胶用的
缓冲液
为什么要和电极缓冲液一致?
答:
如果制胶
缓冲液
和电极缓冲液不一样的话,容易造成点泳池内电场不均一,跑出来的
DNA
条带会不整齐。影响照胶效果
电泳缓冲液
的作用?
答:
TAE的缺点是缓冲容量小,长时间
电泳
(如过夜)不可选用,除非有循环装置使两极的
缓冲液
得到交换。TBE的特点是缓冲能力强,长时间电泳时可选用TBE,并且当用于电泳小于1kb的片段时分离效果更好。TBE用于琼脂糖
凝胶
时易造成高电渗作用,并且因与琼脂糖相互作用生成非共价结合的四羟基硼酸盐复合物而使
DNA
片段...
琼脂糖
凝胶电泳
具体操作步骤是什么?需要注意什么事项?
答:
4、如果
电泳
时电压和温度过高,可能导致出现条带模糊和不规则的DNA带迁移的现象。特别是电压太大可能导致小片段跑出胶而出现缺带现象。5、变性的DNA样品可能导致条带模糊和缺失,也可能出现不规则的DNA条带迁移。在上样前不要对DNA样品加热,用20mM NaCl
缓冲液
稀释可以防止DNA变性。6、太多的
DNA上样
量...
sds
电泳上样缓冲液
如何配置
答:
配制过程:1. 量取1M Tris-HCl (pH6.8) 0.6 ml;50%的甘油5 ml;10%的SDS溶液2 ml;1%的溴酚兰1 ml;2. 加入去离子水定容至10 ml;3. 分装;4. 在4℃可保存数周,-20℃可保存数月之久。你还可以参考下面这个配方:2×SDS
凝胶
加
样缓冲液
组分(摘自《分子克隆》第三版)Tris-...
<涓婁竴椤
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
涓嬩竴椤
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