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t4dna连接酶
为什么E. coli
DNA连接酶
可以
连接DNA
?
答:
1、作用不同 E.coliDNA 连接酶是生物体内重要的酶,其所催化的反应在DNA 的复制和修复过程中起着重要的作用。T4-DNA连接酶即
T4 DNA连接酶
,可以催化粘端或平端双链DNA或RNA的5’-P末端和3’-OH末端之间以磷酸二酯键结合,该催化反应需ATP作为辅助因子。2、连接条件不同 用DNA连接酶连接具有互补...
DNA连接酶
有哪些
答:
T4DNA连接酶
是ATP依赖的DNA连接酶,催化两条DNA双链上相邻的5′磷酸基和3′羟基之间形成磷酸二酯键。可接双链DNA的平末端、相容黏末端及其中的单链切口,在分子生物学中有广泛的应用。T4DNA连接酶是经原核表达,柱层析纯化获得的高纯T4DNA接酶,SDS-PAGE显示为一条62kD的蛋白条带。本品附带10xLigat...
t4dna连接酶
连接什么末端
答:
T4DNA连接酶
可以连接平末端,也可以连接粘性末端。现在常用的DNA连接酶有T4DNA连接酶和大肠杆菌DNA连接酶。T4DNA连接酶可以连接平末端,也可以连接粘性末端,大肠杆菌DNA连接酶只能连接黏性末端。一般在实验中常用的连接酶是T4DNA连接酶。
DNA连接酶
有什么作用?
答:
T4DNA连接酶
是分子量58kD的多肽,是T4噬体感染大肠杆菌而产生的。在连接反应中以ATP为辅助因子,是应用最广的连接酶,有商品供应。它的用途是:①连接带匹配粘端的DNA分子,②使平端的双链DNA分子互相连接或合成的接头相连接。大肠杆菌DNA连接酶能使互相匹配的5′突出端和3′突出端的双链DNA连接,...
E. coli
DNA连接酶
是什么?
答:
1、E.coliDNA连接酶:只连接具有相同黏性末端的DNA分子的基本骨架,即磷酸二酯键。只能连接具有互补配对粘性末端的双链,对平末端效果不佳。2、T4连接酶:分子生物学试验中主要采用
T4DNA连接酶
,因该酶在正常条件下,即能完成连接反应。
T4 DNA 连接酶
是一单链多肽,分子量为68,000道尔顿,它能催化双...
为什么要用
T4DNA连接酶
将DNA切断为平头末端?
答:
T4DNA连接酶
也能催化限制性内切酶切割产生DNA平末端的连接。如果目的序列和载体上没有相同的限制性内切酶位点可供利用,用不同的限制性内切酶切割后的粘性末端不能互补结合。则可用适当的酶将DNA突出的末端削平或补齐成平末端,再用T4DNA连接酶连接,但平末端连接要比粘性末端连接的效率低得多。在分子生物...
T4
噬菌体
DNA连接酶
是什么
答:
基因针线”。
T4DNA连接酶
,来源于T4噬菌体,可用于连接粘性末端和平末端,但连接效率低。噬菌体T4DNA连接酶分子是一条多肽链,分子量为60Ku,其活性很容易被0.2mol/L的KCl和精胺所抑制。此酶的催化过程需要ATP辅助。T4DNA连接酶可连接DNA-DNA,DNA-RNA,RNA-RNA和双链DNA粘性末端或平头末端。
t4连接酶
可以连接多个片段吗
答:
可以。
T4DNA连接酶
的链接特性及运作原理,用于体外DNA连接、连接检测PCR,体内冈崎片断连接成完整基因组DNA有重要作用,连接酶可以连接和同一条链互补在一起的2个片段。
t4连接酶
连接体系怎么计算
答:
最适克隆载体/插入片段摩尔比。经查询t4连接酶连接体系的相关资料得知,t4连接酶连接体系计算公式为最适克隆载体/插入片段摩尔比。T4-DNA连接酶即
T4DNA连接酶
,可以催化粘端或平端双链DNA或RNA的5’-P末端和3’-OH末端之间以磷酸二酯键结合。
t4dna连接酶
buffer絮状沉淀
答:
1、溶液成分比例不当:
T4DNA连接酶
buffer由多个成分组成,包括Tris-HCl缓冲液、ATP、MgCl2、DTT等。这些成分的比例不正确,例如某个成分过多或过少,就导致溶液出现絮状沉淀。在配置溶液时,确保按照正确的配方和比例加入各个成分,可以避免这个问题。2、溶液变质:T4DNA连接酶buffer是一种常用的实验试剂,...
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