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逆转录需要引物吗
生物的转录和
逆转录
是什么意思啊
答:
在体内,转录是基因表达的第一阶段,并且是基因调节的主要阶段。转录可产生DNA复制的
引物
。在反转录病毒感染中也起到重要作用。转录仅以DNA的一条链作为模板。DNA上的转录区域称为转录单位(transcription unit)。RNA聚合酶合成RNA时不需引物,但无校正功能。
逆转录
reverse transcription:也称反转录以RNA为...
逆转录
的
引物
是DNA还是RNA?
答:
是olige dT,成分上来说,属于DNA。你
需要
把RNA
逆转录
成cDNA,olige dT是和mRNA的polyA尾巴配对的。当然,反转录mRNA成DNA不一定用olige dT,还有random primer,stem loop 等。
逆转录
酶的作用
答:
逆转录
酶的三个作用:1、RNA为模板指导的DNA聚合酶活性;2、DNA为模板指导的DNA聚合酶活性;3、RNaseh活性。RNA指导的DNA聚合酶活性;以RNA为模板,催化dNTP聚合成DNA的过程。此酶
需要
RNA为
引物
,多为色氨酸的tRNA,因此没有校正功能,所以由反转录酶催化合成的DNA出错率比较高。RNaseH活性;由反转录...
下一步要做real time pcr,
逆转录引物
怎么选择,随机引物和oligo dT引物...
答:
显然是选random primer更好,其实说明书是有写的啦,原因是RT-PCR
逆转录
是要得到一个所有的RNA的cDNA库,然后再P出你要的“几个基因”,所以不是每个基因的mRNA都是有polyA的,很多都是没有的,microRNA,piRNA,很多都没有哦,所以如果你用oligo dT
引物
,就自然会miss掉很多(确实是很多)的RNA,...
生物。讲一下
逆转录
答:
逆转录
: 以RNA为模板,在逆转录酶的作用下,以四种游离脱氧核苷酸为原料合成DNA的过程。常见于逆转录病毒(某些RNA病毒)的复制中。举例:艾滋病病毒(HIV)、SARS病毒、禽流感病毒是高中阶段会考到的逆转录病毒.
高中生物关于
逆转录
的问题
答:
人类免疫缺陷病毒(HIV)也是一种RNA病毒,含有
逆转录
酶。在小鼠及人的正常细胞和胚胎细胞中也有逆转录酶,推测可能与细胞分化和胚胎发育有关。大多数反转录酶都具有多种酶活性,主要包括以下几种活性。①DNA聚合酶活性;以RNA为模板,催化dNTP聚合成DNA的过程。此酶
需要
RNA为
引物
,多为赖氨酸的tRNA,在...
反
转录
PCR的
引物
答:
单链的cDNA在和其中一个
引物
反应后,不就形成双链了吗?当然和天然的双链还是有区别的,就是在引物结合部位的上游还是单链。所以反
转录
PCR的引物设计就是把cDNA当做双链一样进行的。
RT-PCR的原理是什么?有何用途?
答:
RT-PCR有两种解释:1,最常用的理解:RT 是‘
逆转录
’(reverse transcription)的缩写 2,现在也有人这么用:RT是‘实时’(real time)的缩写 1,先说逆转录PCR:这项技术使用的‘逆转录酶’来自逆转录病毒,是一种能按照碱基互补配对原则,以脱氧核糖核苷酸为底物,以寡居dT为
引物
,把mRNA转换成...
逆转录
PCR的实验步骤用到哪些试剂和仪器
答:
先将DEPC水从容量瓶中倒入瓷缸中,将塑料制品逐个浸泡其中,其中小枪头
需要
吸管打入DEPC水,过夜,然后高压,再烤干备用,实验前将枪头等放入吸头台,再高压一次(EP管)2、玻璃制品:泡酸过夜,冲洗干净,蒙锡纸烤干备用(DEPC水泡)(洗净后先泡1‰DEPC过夜,再烤干)3、匀浆器:(包括剪刀、镊子...
什么叫
逆转录
答:
逆转录
reverse transcription:以RNA以模板合成DNA的过程,是RNA病毒的复制形式,需逆转录酶的催化。其过程先以RNA为模板,合成RNA/DNA杂化双链,然后水解RNA链,再以剩下的DNA单链为模板合成DNA双链。逆转录病毒的逆转录酶有催化这三个过程进行的活性。艾滋病病毒(HIV)就是一种逆转录病毒.还有一些病毒...
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