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阳性克隆PCR验证方法
阴性
阳性
是什么意思
视频时间 00:36
连接在pet-28a上的基因
克隆
菌液能直接测序吗
答:
挑出几个菌落直接培养测序是不适当的.菌落中有很大一部分比例转进去的是空载体,没有成功连入目的基因片段.所以要多挑一些单菌落,培养后用菌液
PCR
或者提质粒后双酶切鉴定是否连入目的基因,选择成功连入目的基因(
阳性克隆
)的再拿去测序.你现在的测序结果,很有可能只是载体本身的序列.dna测序过程,其实是...
求半定量
PCR
的详细步骤 要详细到每一步喔
答:
如果扩增过程已到达平台区,扩增产物就不能反映基因拷贝数的高低。基因芯片的基本原理和Northern 基本相同,类似于点杂交,都是采用杂交原理,差别是基因芯片一般采用荧光探针,可以同时比较很多样品,可以批量处理和自动化。不足之处是检测设备费用高,假
阳性
的比较高,需要其他
方式
予以
验证
。
基因
克隆
的基因克隆技术
答:
基因
克隆
技术包括了一系列技术,它大约建立于70年代初期。美国斯坦福大学的伯格(P.Berg)等人于1972年把一种猿猴病毒的DNA与λ噬菌体DNA用同一种限制性内切酶切割后,再用DNA连接酶把这两种DNA分子连接起来,于是产生了一种新的重组DNA分子,从此产生了基因克隆技术。1973年,科恩(S.Cohen)等人把一段...
哪些
方法
可以检测转基因植物中的外源基因2
答:
4、首次以CaMV35S、FMV启动子、NOS终止子、标记基因NPTII、抗除草剂基因EPSPS、PAT、抗虫基因CryIAb为检测目标,设计、筛选出特异性引物,优化实验参数,建立了转基因植物
PCR
定性检测
方法
体系,灵敏度达0。1﹪。5、
克隆
了CaMV35S、FMV启动子、NOS终止子、标记基因NPTII、抗除草剂基因EPSPS、PAT、抗虫基因...
一学生用蓝白斑做
阳性克隆
筛选,因为疏忽没有在选择性培养基中添加X-gal...
答:
1 不是。因为没有生色底物,阴性菌落虽然可以表达lacZ,但无法显色。2 全部转接至含X-gal的新鲜选择培养基上,培养后看是否为白色。要么以
pcr
法对所有菌落作鉴定。或者所有菌落转接至液体培养基扩增后抽质粒,看质粒大小。
毕氏酵母
答:
构建恶性疟原虫主要裂殖子表面蛋白1C末端相对分子质量1.9万片段(MSP1�19)毕氏酵母真核表达克隆。
方法
利用
PCR
技术扩增出MSP1�19,插入pPIC9载体中,鉴定正确的MSP1�19基因,插入毕氏酵母分泌型表达载体pPIC9k中,DNA测序鉴定序列的正确性,转化酵母细胞。结果 筛选出的
阳性克隆
为MSP1�19表达克隆。结论 用分子...
克隆
后测序后序列问题
答:
挑出几个菌落直接培养测序是不适当的。菌落中有很大一部分比例转进去的是空载体,没有成功连入目的基因片段。所以要多挑一些单菌落,培养后用菌液
PCR
或者提质粒后双酶切鉴定是否连入目的基因,选择成功连入目的基因(
阳性克隆
)的再拿去测序。你现在的测序结果,很有可能只是载体本身的序列。
dgge后续
克隆
测序要用什么克隆试剂盒
答:
2、 经济、简便:省去了对
PCR
产物的酶切和连接过程,节省了购买内切酶和连接酶的成本。本试剂盒自带pfu Taq高效DNA聚合酶,用于对重组体的PCR鉴定,同样节省了酶切鉴定所需的内切酶成本。3、 克隆效率高:通常情况,
阳性克隆
的比例高达80%-100%。适用于高通量操作,批量克隆(可适用于8连管,24、48...
pcr
实验室面积是否有严格要求
答:
基因扩增实验又称
PCR
实验,其特点是能将微量的DNA大幅增加,PCR是分子生物学研究和实验的常规
方法
,广泛应用于生物学各个领域,例如:艾滋病检测、乙型肝炎、禽疫病、癌基因的检测和诊断,DNA指纹、个体识别、亲子鉴定及法医物证,动、植物检疫,动物及其衍生产品检测,动物饲料、化妆品、食品卫生检测,转...
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