44问答网
所有问题
DTT溶液怎么配 用于蛋白质凝胶电泳的上样buffer
如题所述
举报该问题
其他回答
第1个回答 2011-12-18
1、1mol/lDDT溶液配制方法:用20ml 0.01mol/L乙酸钠溶液(pH5.2)溶解3.09g DTT,过滤除菌后分装成1ml小份贮存于-20℃。
注意:DTT或含有DTT的溶液不能进行高压处理。
2、SDS-样品缓冲液:SDS100mg,巯基乙醇0.1ml,甘油1ml,溴酚蓝2mg,加入0.2mol/lpH7.2磷酸盐缓冲液0.5ml溶解;
第2个回答 2011-12-21
使用双蒸水常规方法配制即可,用离心管分装(如50μl),冷冻于-20℃,尽量避免反复冻融。可参考基因分子克隆手册等书籍。本回答被提问者采纳
相似回答
双向
凝胶电泳
操作步骤
答:
双向
凝胶电泳
操作步骤分为几个关键步骤:1. 样品准备: 建议使用8M尿素/4% CHAPS/40mM Tris(基) /65mM
DTT
溶解体系,样品浓度需大于2 ug/ul。样品制备的成败取决于
蛋白质的
溶解性、分子量、电荷数和等电点,需针对特定性质和研究目的进行调整。通常需要多次实验来找到最合适的处理条件。2. 第一向分离...
...blot的Tris-乙酸胶的配方吗?还有相关
电泳
液的配方?急!急!急!非常...
答:
2g)SDS溶于去离子水中,定容至100mL(20mL),加热至68℃助溶。E液——10%过硫酸铵:5g(0.5g)过硫酸铵,溶于50mL(5mL)去离子水中;现配现用或分装至0.5mL离心管中冷冻备用。F液——TEMED(N-N-N`-N`-四甲基乙二胺)原液,室温保存。三、配制Tris-甘氨酸SDS聚丙烯酰胺
凝胶电泳
分离胶所用
溶
...
双向
电泳的
操作步骤
答:
第一向等电聚焦⒈ 从冰箱中取-20℃冷冻保存的水化
上样
缓冲液(I)(不含
DTT
,不含IPG
buffer
)一小管(1ml/管),置室温溶解。⒉ 在小管中加入0.01g DTT, 0.5% 对应胶条pH范围的IPG buffer,充分混匀。⒊ 从小管中取出400ml水化上样缓冲液,加入100ml样品(考马斯亮蓝染色需样品1mg,银染...
双向
凝胶电泳的
操作步骤
答:
1、建议使用的蛋白质溶解体系为8M尿素/4%CHAPS /40mMTris(Base)/65mM
DTT
;2、样品浓度大于2 μg/ μl; 等电聚焦蛋白质是两性分子,在不同的pH环境中可以带正电荷、负电荷或不带电荷。对每个蛋白质来说都有一个特定的pH,此时
蛋白质的
静电荷为零,此pH值即该蛋白质的等电点(pI)。将蛋白...
大家正在搜
sds凝胶电泳根据蛋白质的
蛋白质溶液属于真溶液
蛋白质溶液属于溶胶吗
蛋白质双向凝胶电泳
蛋白质凝胶电泳图
蛋白质凝胶电泳实验步骤
蛋白质凝胶电泳实验报告
蛋白质电泳条带怎么看
蛋白质电泳结果怎么看
相关问题
请教上样缓冲液配方中DTT的用法
western blot蛋白含量测定时 上样缓冲液要含dtt...
5*SDS-PAGE蛋白上样缓冲液之前需要细胞裂解液吗
SDS-PAGE电泳求助专题
聚丙烯酰胺凝胶电泳是什么 原来没出现过
蛋白质提取问题
双向电泳的操作步骤
根据对样品的处理方式不同,聚丙酰烯胺凝胶电泳分为哪几类