高中生物，基因工程，帮忙解答一下这一题

Question

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Answer 1

这个都不一定，只要切出来的序列断口是可以碱基互补的就可以，可以ABCD全用同一种限制酶切割（这样的话断口全是可以互补配对的，但是在用DNA连接酶时无法防止目的基因和运载体自身环化），也可以AC用一种，BD用一种（这样可以防止自身环化，而且确定了目的基因接在运载体上的顺序），甚至实际应用中可以出现ABCD全用互不相同限制酶的情况，但是因为某些限制酶虽然识别的回文序列不同但切口处碱基序列相同，所以依旧可以连得上。综上，用什么限制酶取决于在适合的位置有没有它可以识别的回文序列以及切开的序列能否满足下一步连接的要求。说的有点复杂，找些题目来做做就很容易理解。感谢采纳，祝生活愉快！