cck8实验原理是什么?

如题所述

cck8实验原理:

细胞活力检测试剂盒(CCK-8) 可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。

其基本原理为:该试剂中含有WST-8【化学名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】。

在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯(1-Methoxy PMS)的作用下被细胞中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物(Formazan dye)。

生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比。因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。CCK-8法是用于测定细胞增殖或毒性实验中活细胞数目的一种高灵敏度,无放射性的比色检测法,可替代传统的MTT法。

使用方法:

1、在96孔板中接种细胞悬液(100 ul /孔),通常细胞增殖实验每孔约2000个细胞,细胞毒性实验每孔约5000个细胞。具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小、细胞增殖速度的快慢等因素调整。

2、若进行细胞毒性实验,按照实验需要培养并给予0-10ul特定的药物刺激,处理一段适当的时间。若进行细胞增殖实验,则跳过此步,直接加入CVTK进行检测。

以上内容参考:百度百科-CVTK试剂

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