蛋白质分离纯化技术中哪些与它的等电点有关?试述这些技术分离提纯蛋白质的原理。

Question

如题所述

Answer 1

【答案】：①等电点沉淀法：蛋白质是两性化合物，在等电点时其溶解度最小。不同蛋白质氨基酸组成不同，等电点不同．调节蛋白质混合溶液的pH值，可使他们分次沉淀出。②离子交换层析：常用的有CM(分子中带有羧甲基基团，—O—CH₂—COOH)和DEAE—(阴离子交换剂，带有二乙氨基乙基基团)。蛋白质与离子交换剂的结合能力取决于彼此间相反电荷基团的静电吸引，在某一pH条件下，不同蛋白质氨基酸组成不同，pI不同，所带的静电荷性质、数量不同，与离子交换纤维素的吸附能力不同。通过改变洗脱液的pH和离子强度，可把不同的蛋白质依次洗脱下来。③电泳法(等电聚焦)。