为什么sds-page能跑出条带而western blot没有

如题所述

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第1个回答 2017-10-21

转膜失败～蛋白质根本没有跑到膜上／一抗、二抗失效／显色液失效～

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western blot跑不出条带,是什么原因啊?答：转膜的问题，膜和胶之间有气泡等。Westernblot法即是一种将电泳与KIJSA结合起来的技术，可分为电泳、转印、酶免疫测定3个阶段。Westernblot法结合了电泳的高分辨率和酶免疫测定的高敏感性和特异性，是一种能用于分析样本组分的免疫学测定方法。生物大分子印迹法实际上是凝胶电泳技术、固定化技术及分子亲和...

western blot试验中遇到的问题,希望能帮到正在苦恼的你~答：1.考虑没有完全变性，适当提高SDS浓度，同时延长煮沸时间。2.考虑蛋白浓度过高，加入缓冲液稀释。1. 电压：低电压下筛选效应充分，条带漂亮。2. 胶的均匀度：胶越均匀，条带越窄，分离越均匀。︶笑脸型：凝结冷却不均匀，中间冷却不好。︵皱眉状：可能凝胶和玻璃板底部有气泡。拖尾：样品溶解不...

凝胶酶谱和western blot的区别?答：主要是方法不同吧酶谱法的基本过程是先将样品进行SDS-聚丙烯酰胺（SDS-PAGE，含0.1％明胶）电泳分离，然后在有二价金属离子存在的缓冲系统中使样品中的 MMP-2（基质金属蛋白酶-2）和MMP-9 恢复活性，在各自的迁移位置水解凝胶里的明胶，最后用考马斯亮蓝将凝胶染色，再脱色，在蓝色背景下可出现白...

Western blot实验电泳时 Marker条带不清晰,很弥散,无法辨别有几条带...答：如果只是marker不清晰，就是markr没煮好，或者降解了。重新换一个新marker，严格按配方煮。如果所有条带都这样那就是胶的问题。胶的前沿跑的齐吗？速度如何？如果跑的时候就不正常那也可能是电泳缓冲液配错了。

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