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怎么检测蛋白质的等电点
测量
蛋白质等电点
的方法有哪些?谢谢
答:
交错分配法
。对一种特定的蛋白质,在不同盐系统中,pH和其分配系数之间的关系应不同,而在等电点时,得到的均为不带电时分子的分配系数。对不同的盐系统,其等电点时的分配系数应相等,两条pH和分配系数关系的曲线必交于一点,
该点所对应的pH值即为该特定蛋白质的等电点
。根据这一原则测定蛋白...
在
蛋白质等
电子
测定
过程中,
如何
根据实验现象判断酪
蛋白的等电点
?
答:
1)最小溶解度法
。蛋白质在不同pH溶液中形成不同的浊度来测定,即最大浊度处的pH值为蛋白质的等电点值。浑浊最严重时的pH值,即为酪蛋白的等电点。2)
等电聚焦法
。等电聚焦完成后,切成胶条,测量不同段的pH值,并用三氯醋酸显色,即可确定酪蛋白的等电点。
是不是所有的
蛋白质
都能用
沉淀法测等电点
答:
如果要测定准确的等电点,一般是不同pH条件下测量蛋白质的电泳迁移率,
然后用迁移率对pH作图,对应于迁移率为零的pH就是蛋白质的等电点
。按照蛋白质等电点不同而进行分离的电泳方法称为蛋白质等电聚焦电泳。由于其分辨率可达到0.01pH单位,故特别适用于分离分子量相近而等电点不同的蛋白质组分。
在实训中根据
蛋白质的
什么性
质测定
其
等电点
答:
蛋白质由许多包含弱酸弱碱集团的不同氨基酸组成。它们表面的净电荷会随着周围环境的pH值改变而改变。当某一环境pH时表面净电荷为零,此时的pH值即为该
蛋白质的等电点
。
测量
蛋白质等电点
的方法有哪些?谢谢
答:
测定等电点的方法是在不同pH条件下测量蛋白质的电泳迁移率
,然后用迁移率对pH作图,对应于迁移率为零的pH就是蛋白质的等电点。按照蛋白质等电点不同而进行分离的电泳方法称为蛋白质等电聚焦电泳。由于其分辨率可达到0.01pH单位,故特别适用于分离分子量相近而等电点不同的蛋白质组分。
测定蛋白质等电点
的方法的原理是什么
答:
常用聚丙烯酰胺凝胶)内制造一个pH梯度,电泳时每种蛋白质就将迁移到等于其
等电点
(pI)的pH处(此时此蛋白质不再带有净的正或负电荷),形成一个很窄的区带。还有一种是根据蛋白在等电点时的溶解度来测定,配制一系列不同pH的缓冲液,
测定蛋白质的
溶解度,溶解度最小的pH就是蛋白的pI。
蛋白质等电点测定
方法
答:
要
测定蛋白质的等电点
,一种常用的方法是采用平板等电聚焦技术。该方法基于蛋白质分子在特定环境下,如Bio-Rad Model 111Mini IEF Cell这种仪器中,能够在连续且稳定的线性pH梯度中进行电泳。在此过程中,蛋白质并不单纯按照等电点的不同进行分离,而是根据其电荷特性在pH梯度中移动。进行样品处理时,...
还可以用什么方法
测蛋白质的等电点
答:
●方法:平板等电聚焦 ●原理:
蛋白质
分子在含有载体两性电介质形成的连续而稳定的线性pH梯度中进行电泳。但不自是按照
等电点
不同被分离。●仪器:Bio-Rad Model 111Mini IEF Cell ●样品要求:●液体:浓度>3mg/ml;体积>200ul;固体:质量>200ug ●样品纯度>90%;含盐量<3 0mM;分子量:一般...
蛋白质等电点
的
测定
视频时间 08:16
采用电泳技术
如何测蛋白质等电点
?
答:
等电点聚焦的方法可以
测定蛋白质的等电点
,前提是你要对pH梯度做的足够精细。等电点聚焦就是从正极到负极的电泳液配制成pH连续变化的液体,然后进行电泳,我们知道等电点的时候蛋白质静电荷为零,所以他就不动了。也就是说蛋白质最终都会停在等电点的pH的区域里。
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