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环状聚合酶延伸反应
介绍一下 PCR
答:
(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合;③引物的
延伸
:DNA模板--引物结合 物在TaqDNA
聚合酶
的作用下,以dNTP为
反应
原料,靶序列为模板,按碱基配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板DNA 链互补的半保留复制链重复循环变性--退火--延伸三过程,就可获得更多的...
什么是PCR?
答:
(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合;③引物的
延伸
:DNA模板--引物结合 物在TaqDNA
聚合酶
的作用下,以dNTP为
反应
原料,靶序列为模板,按碱基配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板DNA 链互补的半保留复制链重复循环变性--退火--延伸三过程,就可获得更多的...
基因扩增的基因扩增-PCR技术
答:
多聚酶
链式
反应
的原理类似于DNA的天然复制过程。在待扩增的DNA片段两侧和与其两侧互补的两个寡核苷酸引物,经变性、退火和
延伸
若干个循环后,DNA扩增2n倍。1.变性:加热使模板DNA在高温下(94℃)变性,双链间的氢键断裂而形成两条单链,即变性阶段。2.退火:使溶液温度降至50-60℃,模板DNA与引物...
聚合酶
链式
反应
的循环参数
答:
如图所示:现在有些PCR因为扩增区很短,即使Taq酶活性不是最佳也能在很短的时间内复制完成,因此可以改为两步法,即退火和
延伸
同时在60℃-65℃间进行,以减少一次升降温过程,提高了
反应
速度。 PCR反应的特异性决定因素为:①引物与模板DNA特异正确的结合;②碱基配对原则;③Taq DNA
聚合酶
合成反应的...
[遗传性β地中海贫血病CD17点突变的快速简便检测]遗传性地中海贫血...
答:
摘要:利用
聚合酶延伸
技术及双链特异性嵌入染料的特性,建立了一种快速简便的基因点突变的检测方法,在特定引物聚合过程中,不同基因型的
聚合反应
进程被实时转换为荧光信号,通过监测荧光信号的变化实现基因点突变的快速检测,不需要复杂的凝胶电泳、荧光和同位素标记等操作,通过对β珠蛋白基因CD17点突变的检测,证实该方法是...
pcr名词解释生物化学
答:
只要能分离出一丁点的DNA,就能用PCR加以放大,进行比对。这也是“微量证据”的威力之所在。由1983年美国Mullis首先提出设想,1985年由其发明了
聚合酶
链
反应
,即简易DNA扩增法,意味着PCR技术的真正诞生。到如今2013年,PCR已发展到第三代技术。拓展知识:1976年,台湾科学家钱嘉韵,发现了稳定的TaqDNA聚合...
为什么在PCR
反应
过程中,使用三个不同的温度变化
答:
第二个温度点叫做退火,根据引物的TM算出,一般比TM低5度,有利于引物的结合。第三个温度叫做
延伸
,一般采用72度。是引物结合后DNA
聚合酶
按照模板合成新的链。一分钟一千个碱基对。如此循环。现在很多PCR都采用2部法,由于采用了不同的DNA聚合酶(最佳温度60度)。这样退火和延伸采用一个温度。
什么是多
聚合酶
链式
反应
(Polymerase Chain Reaction:PCR)
答:
聚合酶
链式
反应
(英文全称:Polymerase Chain Reaction),简称PCR。聚合酶链式反应(PCR)是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法,由高温变性、低温退火(复性)及适温
延伸
等几步反应组成一个周期,循环进行,使目的DNA得以迅速扩增,具有特异性强、灵敏度高、操作简便、省时等特点。它不仅可用于基因分离、克隆和...
PCR的原理
答:
(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合;③引物的
延伸
:DNA模板--引物结合 物在TaqDNA
聚合酶
的作用下,以dNTP为
反应
原料,靶序列为模板,按碱基配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板DNA 链互补的半保留复制链重复循环变性--退火--延伸三过程,就可获得更多的...
多聚酶
链式
反应
的反应原理
答:
2. 低温复性:在体系温度降至55-60℃ ,模板DNA与引物按碱基配对原则互补结合,使引物与模板链3’端结合,形成部分双链DNA。3. 中温
延伸
:体系
反应
温度升至70-75℃ ,热稳定DNA
聚合酶
以单链DNA为模板,在引物的引导下和Taq酶的催化下,利用反应混合物中的4种脱氧核苷三磷酸(dNTP),按5’到3...
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