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qRtPCR
qrtpcr
数据三个重复如何处理
答:
首先建议生物学重复和技术重复保证三个左右,如果样本只有两个donor,可以将两者混匀后作为第三个样本。三个技术重复可以更加确保你数据的准确性。-△△CT方法中参照因子的选择决定于基因表达定量实验的类型。最简单的设计就是把未经处理的样品作为参照因子(calibrator )。经内标基因均一化处理後,通过...
RT-
PCR
,
QRT
-PCR,real-timePCR之间什么区别
答:
RT-
PCR
是反转录PCR,
QRT
-PCR指包含反转录的定量PCR实验方法,real-timePCR是一切实时定量PCR的总称
RT-
PCR
,
QRT
-PCR,real-timePCR之间什么区别
答:
time)。
qRT
-
PCR
是最合理的写法,也就是把RT-PCR(反转录PCR)+qPCR(定量PCR)=qRT-PCR,或者写成RT-qPCR。如果你做的是荧光定量,还可以写成RT-fq-PCR(f代表荧光)。其实不用纠结的...现在这些概念有些混乱,其实是一个意思。但是想说明的是RT-PCR最开始的时候是用来表示反转录PCR(Reverse Tr...
qrt pcr
上下游引物 可以在相同外显子上吗
答:
可以。但Qpcr是为了基因表达定量,所以要确保引物扩出来的是你想要的片段。如果上下游引物都在同一个外显子,可能会以RNA提取时残留的基因组DNA作为模板进行扩增,导致实验数据不准确。如果一定要在同一外显子,那么在设计引物之后一定要通过软件预测一下是否会出现非特异扩增(当然,跨外显子的也是要的)...
各位大侠,
qRT
-
PCR
需要加抗体吗
答:
又不是做蛋白实验,需要啥抗体。
PCR
实验都是关于核酸的,自然不需要抗体,所需的东西叫做引物、探针之类的。
qrt
-
pcr
中为什么cdna比rna稳定
答:
RNA很容易降解,因为环境中到处都是RNA降解酶,一般要-80度保存两周,cDNA结构就要稳定很多
请教
qRT
-
PCR
数据统计问题
答:
这样算:你先把几次试验的对照组的平均值设为1, 再把每个单独试验对照组的数值算出和这个对照组平均值的差异,就可以计算标准差了。这么简单的统计分析,用不着SPSS吧, excel就可以解决了。
qrt
-
pcr
加cDNA的量,怎么加
答:
因为你所要检测的目的片段丰度不同,所以需要先做个预实验。怎么做呢?你先把cdna进行梯度稀释,然后进行
pcr
,如果你的primer所扩增的ct值在15-25之间,那么就是很不错的稀释梯度啦~以后实验久按照这个浓度加就好了
qrt
-
pcr
加cDNA的量,怎么加
答:
因为你所要检测的目的片段丰度不同,所以需要先做个预实验。怎么做呢?你先把cdna进行梯度稀释,然后进行
pcr
,如果你的primer所扩增的ct值在15-25之间,那么就是很不错的稀释梯度啦~以后实验久按照这个浓度加就好了
设计
qRT
-
PCR
引物时,一个基因有多个变体,要选择哪一个来设计引物才能使定...
答:
1 基因有多种变体,该怎么设计?你如果仅仅检测这个基因的表达量,你可以将引物设计在这多种变体的保守区域内,就是所有变体都包含的区域。如果你明确要检测哪一个变体,就设计在这个变体独有的区域内。2 引物blast后的产物有多种 你应该是在NCBI上进行的primer blast吧?你只要看到你的引物扩增出来的...
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