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qRtPCR
为什么有些rna类核酸,进行实时
pcr
扩增时没有延伸这一步
答:
由于逆转录反应使用了引物和模板,通过特定的引物能在复杂样品中得到的特定序列的DNA: 1。绝对定量和相对定量。 2,你可以收集一定数量的T细胞并提取RNA,用相对转录量不变的基因为内参;之称,也是聚合酶链式扩增的(
PCR
是‘链式扩增反应’polymerase chain reaction 的缩写)故称为RT-PCR,于是就有了RT...
pcr
原始数据怎么提供
答:
查询资料。
pcr
原始数据包括原始图片,甚至还有荧光定量(
qRT
-
PCR
)的原始数据。还有的机构要求有溶解曲线,扩增曲线,没有经过任何修饰的免疫组化、免疫荧光图片。原始证物就是我们文章结果真实性的(证物)。假如真的是由于疏忽,非主观造假,那么可以查原始数据,有很多质疑的发表了十几年的文章也是通过提供了...
qPCR检测,你需要知道这些
答:
Song等(2002)利用
qRT
-
PCR
估计了转基因玉米愈伤组织和植物中的转基因拷贝数,该研究还使用Southern杂交重新测量了玉米愈伤组织和植物中的“精确”转基因拷贝数,结果qRT-PCR的测量结果与“精确”结果有较高相关性,因此,他们认为 qRT-PCR可以作为一种评估转基因玉米拷贝数的有效手段。 拷贝数鉴定的关键是获得一个拷贝数...
定量方法知多少--绝对定量
答:
缺点: 无法进行
qRT
-
PCR
的逆转录步骤,大大影响了反应效率。PCR扩增片段: 通过常规PCR进行目的片段扩增,回收纯化PCR扩增片段,可直接作为标准品,相对于质粒,PCR扩增片段不是那么稳定。质粒克隆:将目的片段进行PCR扩增,回收目的条带后连入T载体,再进行质粒提取,OD值定量,将质粒梯度稀释作为标准品使用...
做RT-
PCR
内参的作用是什么?应该如何选择管家基因
答:
你说的应该是real time
PCR
吧,注意RT其实是逆转录reverse transcription的缩写,和real time一定要分开来.常说的qPCR,
qRT
-PCR,都是通过实时(real time)的方法,测定样品中某个模版的起始量ct值 但是呢,由于之前RNA提取、反转等步骤,各个步骤存在不同的效率,ct值并无法真实反应样品中模版的绝对量,因此,...
做RT-
PCR
的时候为什么要设置标准反应体系和管家基因反应体系?
答:
标准反应体系里面有引物,dNTP,Taq酶,等
PCR
所必须的东西,所以必须有反应体系,引物有可能形成二聚体,在PCR 过程中即可看到,一般位于MARKER最小带的上面(也就是说很小,是指引物之间互相配对儿),管家反应体系我不懂了……DNA模板梯度的设置时为了选取DNA模板最合适的浓度,浓度过低可能得不到结果...
现在有哪几种
PCR
的方法啊?
答:
Q-
PCR
is commonly used to determine whether a DNA sequence is present in a sample and the number of its copies in the sample. Quantitative real-time PCR has a very high degree of precision.
QRT
-PCR methods use fluorescent dyes, such as Sybr Green, EvaGreen or fluorophore-containing DNA ...
QPCR运行过程中仪器和电脑卡住了
答:
定量即时
PCR
及定量反转录PCR(quantitative reverse transcription PCR,
qRT
-PCR)已被众多科学家采用,因为其侦测范围广、灵敏度高、准确、专一及快速。qPCR的发展因为侦测感染病患的病毒或细菌量、癌症监测、诊断个别基因差异的用药反应等应用而大幅提高。qPCR的方法是基于侦测目标物在反应前及PCR后产物的量化...
宝藏!转基因株系检测的N种方法
答:
荧光定量
PCR
,如Taqman探针法和SYBR Green I法,不仅用于相对表达的定量,还能进行绝对拷贝数鉴定和基因型识别,是检测的黄金标准。图1-5犹如解码器,展示了PCR体系的运作,以及
qRT
-PCR和Western blot的直观演示。SDS-PAGE和Western blot技术联手,通过蛋白电泳和抗体检测,揭示蛋白表达的动态变化,如FIE...
一个物种的cds序列可以用来设计荧光定量
PCR
的引物吗?求高手指点迷津啊...
答:
可以啊 只要是mRNA上的就可以了 一般扩增产物长度150-200最好
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