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qRtPCR
pcr
技术的基本原理和过程
答:
pcr
技术的基本原理和过程如下:
qRT
-
PCR
(定量逆转录聚合酶链式反应)是利用逆转录酶将RNA模板转录为cDNA,再使用Taqman探针或SYBRGreen等荧光染料检测cDNA的定量过程。以下是关于qRT-PCR原理的更加详细介绍。首先,RNA模板经过逆转录反应转化为cDNA,其中需要引物与逆转录酶配合作用,以产生目标序列所需的反向...
以下哪些因素会导致
pcr
扩增产物污染
答:
需要注意的是,对于真正的实时荧光定量
PCR
,部分降解的RNA可能无法给出基因表达的精确结果。未使用“预混液”
qRT
-PCR是一种分析RNA的高灵敏工具。由于PCR反应会扩增目的基因,所以误差也会被同时扩增出来。因此,无论何时都应当确保变异处于最低水平。“预混液”是反应试剂的混合液,在设置建立多个反应时...
ariamx荧光定量
pcr
使用方法
答:
ariamx荧光定量
pcr
使用方法:1、开机:打开荧光定量
PCR
仪以及与之相连的电脑。2、放样:点击PCR仪上的Eject,放入已离心过的八连管样品,再缓慢关闭接样台。3、点击电脑上的E盘,找到
qRT
-PCR文件夹,找到相对应的应用程序。4、编辑存档。
做RT-
PCR
内参的作用是什么?应该如何选择管家基因
答:
你说的应该是real time
PCR
吧,注意RT其实是逆转录reverse transcription的缩写,和real time一定要分开来。常说的qPCR,
qRT
-PCR,都是通过实时(real time)的方法,测定样品中某个模版的起始量ct值 但是呢,由于之前RNA提取、反转等步骤,各个步骤存在不同的效率,ct值并无法真实反应样品中模版的绝对量...
转染sirna后做q-
pcr
做出来结果没区别怎么办
答:
1.siRNA转染后什么时候做
qRT
-
PCR
检测最好?siRNA的沉默效果是有时效性的,在最佳的时间点观察,会得到更加明显的沉默效果,这个时间点的确定不能以同一株细胞转染DNA的经验确定,因为一个是消耗mRNA,一个是产生mRNA。对转染siRNA,在核酸水平,转染后8-48小时,即可观察到mRNA水平的逐步下降,一般来说...
RT-
PCR
的原理是什么?有何用途?
答:
于是就有了RT-
PCR
。2, 再说实时PCR 细胞瞬时转录的mRNA种类颇多,各种mRNA含量也有实时的改变,这反映了细胞核内转录因子根据环境要求在做出相应的变化,realtime-PCR,以及quantitative realtime-PCR (简称
qRT
-PCR)就应运而生。原理:利用PCR高度的特异性,通过特定的引物能在复杂样品中得到的特定序列...
实时定量
PCR
时用的ROXrefence有什么作用
答:
ROX Reference Dye,可用于需要Dye的Real Time
PCR
扩增仪,用于ABI、Stratagene等公司的Real Time PCR扩增仪上,用以校正孔与孔之间产生的荧光信号误差.并不是每次都会用到.一般有ROX Reference Dye和ROX Reference Dye II两种,针对不同的PCR仪.一般ABI PRISM 7000/7700/7900HT和7300 Real-Time PCR ...
rt-
pcr
和
q rt
- pcr是一种东西吗?
答:
qRT
-
PCR
和RT-PCR当然不是一种,一般qRT-PCR就是你后边提到的那一串英文,中文叫做实时定量PCR,这个不是半定量,southern杂交和Northern杂交才属于半定量。而RT-PCR通常指的是反转录PCR,英文是reverse transcription PCR,就是先将mRNA反转录成cDNA,然后再以cDNA为模板,用PCR方法加以扩增。半定量:半...
RT-
PCR
的原理是什么?有何用途?
答:
让你不得不尽快把珍贵的信使RNA转化成稳定的形式,于是就有了RT-
PCR
。2, 再说实时PCR细胞瞬时转录的mRNA种类颇多,各种mRNA含量也有实时的改变,这反映了细胞核内转录因子根据环境要求在做出相应的变化,realtime-PCR,以及quantitative realtime-PCR (简称
qRT
-PCR)就应运而生。原理:利用PCR高度的特异...
求助miRNA
QRT
-
PCR
引物设计
答:
反转录茎环通用序列:GTCGTATCCAGTGCGTGTCGTGGAGTCGGCAATTGCACTGGATACGACmiRNA序列:>mmu-miR-99b-5pMIMAT0000132 Mus musculus miR-99b-5pCACCCGUAGAACCGACCUUGCGmmu-miR-99b-5p反转录颈环引物为:GTCGTATCCAGTGCGTGTCGTGGAGTCGGCAATTGCACTGGATACGACCGCAAG定量
PCR
反向引物为:TGTCGTGGAGTCGGC正向...
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