双缩脲不直接和蛋白质反应,鉴别蛋白质的是双缩脲试剂。
双缩脲试剂本是用来检测双缩脲,由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的
肽键,因此也能与铜离子在碱性溶液中发生双缩脲反应。当底物中含有肽键时(多肽),试液中的铜与多肽配位,
配合物呈紫色。可通过比色法分析浓度,在紫外可见光谱中的波长为540nm。鉴定反应的灵敏度为5-160mg/ml。
双缩脲试剂与双缩脲的区别:
双缩脲(NH2CONHCONH2)是两个分子脲经180℃左右加热,放出一个分子氨后得到的产物。
双缩脲试剂是由双缩脲试剂A和双缩脲试剂B两种试剂组成;双缩脲试剂A的成分是
氢氧化钠的质量分数为0.1 g/mL的水溶液;双缩脲试剂B的成分是
硫酸铜的质量分数为0.01 g/mL的水溶液。简单的说, 双缩脲是一种化学物质,而检测蛋白质用的那两个试剂之所以叫双缩脲试剂,是因为检测原理和双缩脲的形成相似。